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内参引物和看家基因 荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起吗
做相对定量PCR 时,目的基因CT 值比内参基因CT 值低,是什么原因,别人 有多种原因。如果根据经验目的基因的表达确实应该低于内参基因的话,常见的问题是模板异常,如严重的DNA污染等。但也不排除其他原因,如引物特异性等。荧光定量PCR的内...
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为什么PCR要经历三十多次循环? 跑PCR循环次数过多
PCR循环次数是否越多越好?为什么 PCR循环次数通常就是30左右.循环数太多了,虽然可以一定程度的提高产物量,但是由于反应时间过长,有一些非特异产物的扩增也会相应增加,而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其...
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如何确定pcr反应中最佳循环数 qpcr看家基因板间差异大
Realtime PCR如何减小复孔误差值?为什么我前后两次对同一批次的cDNA进行的realtime PCR差异很大? 误差造成的原因太多了,这种情况最需避免的就是加样的时候造成了加样量之间的误差,建议多做几个重复,将重复中数据明显差距几...
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扩增曲线不光滑 实时荧光定量PCR中华扩增曲线为什么不平滑?
定量PCR的扩增曲线的平台期为什么是锯齿状 1、反应体系随着PCR的进行,造成阻碍物增多,到平台期时达到最高水平,影响机器的正常检出;需要优化反应体系各个离子的含量2、机器本身不稳定造成的影响,不过这种情况很少发生做PCR时Ct值较小,扩增...
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DNA聚合酶的活性怎么检测 请问DNA聚合酶活性的测定方法是什么?
请问DNA聚合酶活性的测定方法是什么? TAG:酶活性的测定方法2113 酶活性测定5261 硝酸还原酶活性测定 dna聚合酶4102 taq dna聚合酶 dna测定 dna浓度的测定 dna聚合酶的结构1653 dna定量测定 hbv ...
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PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别 实时荧光定量pcr技术数据处理
实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么? 原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光.反应要求:荧光...
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伯乐Bio-Rad小垂直板电泳槽如何操作 biorad 跑胶槽
酒精能杀死霉菌吗? 在用乙醇对霉菌杀菌对其浓度为70%~95%,这样对大部分霉菌有杀灭作用,如果低于这个浓度,对霉菌的杀菌作用就很弱了。而且酒精只能消毒无法灭菌,酒精要灭杀孢子需要相当长。GM试验是什么?和G试验是一个意思吗 1,3-β-D...
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pcr需要注意的问题 假活性聚合
假基因有什么意义 假基因(pseudogene)具有与功能基因相似的序列,但由于有许多突变以致失去了原有的功能,所以假基因是没有功能的基因,常用ψ表示。1977年在爪蟾的5S基因系统中发现了假基因。光触媒除甲醛是骗局吗? 我国作为发展中国家...
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高电压与跑胶拖尾 琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾
全基因组DNA跑胶拖尾 如果连MAKER都没有2113跑开,那就应该是胶的问题了。先把5261胶做好了4102再跑试试看 1%的琼脂糖凝胶跑DNA应该是可以1653的我感觉可能1 胶放置的时间不够 还没有完全凝固 因此跑的乱2.做胶的时候琼...
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您好!1.我也要做差异基因表达这方面的实验,但是我们不是看某个已知基 基因表达量实验怎么重复比较好
怎样比较两个细胞的基因表达情况 请解释一下如何用半定量PCR检测基因的表达量,要详细的过程和这么做的原因,非常感谢 我觉得你做一个实时定量吧…半定量现在谁还用啊。你要是有荧光定量PCR,就自己做。没有就送出去公司做,你要想学自己跟过去在公司...