如何进行氯化铯密度梯度离心提取核DNA dna浮力密度的测定

生物化学习题！判断题！1、卫星DNA富含GC，浮力密度较小。2、磷酸酯是合成中性酯和磷酯的共同中间产 1 卫星DNA g-c含量一般少于主带中的DNA，浮力密度也低。2 题目不完整。为什么DNA可以用碱变性而RNA不能采用碱变性，而一般用 DNA可以用碱变性而RNA不能采用碱变性的原因：因为DNA耐碱，而RNA中核糖的2‘羟基还在，可以在碱性条件下攻击磷酸二酯键，使其断裂。碱变性法提取质粒DNA原理：普遍采用的碱。如何进行氯化铯密度梯度离心提取核DNA 大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化，常用柱层析法和氯化铯梯度离心法。常使用的所有纯化方法都利用了质粒DNA 相对较小及共价闭合环状这样两个性质。例如，用氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心分离质粒和染色体DNA 就取决于溴化乙锭与线状以及与闭环DNA分子的结合量有所不同。溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合，进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加，作为补偿，将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后，超螺旋度大为增加，从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限，可继续结合更多溴化乙锭，直至达到饱和(每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子)。由于染料的结合量有所差别，线状和闭环DNA分了在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来，氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时，为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁，但其中最好的方法，也应是聚乙二醇分级沉淀法，最近已得到改进(R.Treisman，个人通讯)并达到较高境界，使用该方法可得到极高纯度的质粒。聚乙二醇分级沉淀法与。

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