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等电点不沉淀的蛋白质 为什么蛋白质溶液在其等电点时,容易发生沉淀?

2021-04-26知识3

何谓蛋白质的等电点和沉淀反应?有何实用意义? 由于蛋白质表面离子化2113侧链的存在,5261蛋白质带净电荷。由于4102这些侧链都是1653可以滴定的,对于每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点。蛋白质沉淀,外文名precipitation,破坏蛋白质分子的水化作用或者减弱分子间同性相斥作用的因子,使蛋白质在水中的溶解度降低而沉降下来转化为固体的分离方法。扩展资料在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物。等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小,从而有利于悬浮液的过滤。在等电点外的所有其他pH值,依据蛋白质所带净电荷采用电泳和离子交换层析来分离和分离纯化该蛋白质。等电点沉淀主要应用于蛋白质等两性电解质的分离提纯,还可应用于大豆异黄酮的分离:用等电点沉淀法脱去蛋白质,可提高异黄酮制品的纯度,异黄酮截留率为7.2%,蛋白质截留率为91.1%。参考资料来源:-蛋白质等电点参考资料来源:-蛋白质沉淀

为什么蛋白质溶液在其等电点时,容易发生沉淀? 蛋白质在溶液中是2113呈胶体性质的。也就是蛋5261白质自身所带的电荷与水分子形成了双4102电层,因为这1653种双电层的存在,使得蛋白质胶体互相排斥,不至于在做布朗运动的时候相互聚集。等电点时,蛋白质的静电荷为0,也就破坏了这种双电层,导致蛋白质相互聚集在一起,从而形成大颗粒沉淀出来。

请问蛋白质在等电点时必然沉淀吗? 在等电点时,各种蛋白质仍有一定的溶解度而使沉淀不完全.所有的蛋白质都具有等电点,在等电点时它们的电荷为零,溶解度最小,但是不一定所有的蛋白质在等电点都会沉淀.等电点沉淀在应用于酸性或碱性目的蛋白时也许效果很好,但是对于具有中性等电点的蛋白,尽管pH在它的等电点处,但是它有可能含有净电荷很不相同的区域,这时很难或不可能用中性等电点来沉淀这些蛋白质.

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