RNA提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些 细胞中的RNA主要有三类:rRNA约占80%-85%,tRNA和核内小分子RNA约占10%-15%,mRNA约占1%-5%,由于rRNA占绝大多数,因此我们用琼脂糖凝胶电泳可以看到的即是rRNA,它也有。
如何检测RNA提取成功或如何检测RNA的完整性 检测RNA的完整性的方法: 完整的总RNA在进行变性凝胶电泳时会产生清晰的28S和18S rRNA条带(真核 样品)。28S rRNA条带的强度应当大致为18S rRNA条带的两倍。。
为什么DNA和RNA的提取方法不同? 不同的原因是:RNA分子量小,集中于细胞质中,易分解。DNA分子量较大,集中于细胞核中,化学性质稳定。因此提取RNA时要使用抑制RNA酶的试剂,并要除去DNA污染。。
RNA的提取方法 1、酚抽提法:先2113用蛋酶K、SDS破碎5261细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高4102速离心后取1653上清,所得DNA大小为100-150kb2、甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。4、异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)5、表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。6、加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。7、碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和,离心后取上清,含少量DNA。扩展资料:DNA提取原则:1、保证核酸一级结构的完整性;2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;4、其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。参考资料来源:—DNA提取
实验中提取DNA 的目的与提取RNA 的目的有什么区别? 提取RNA主要是为了对基因表达进行分析.提取DNA主要是对基因和基因组进行分析.
提取RNA的实验中各个试剂的作用是什么?