如何判断提取质粒DNA的纯度 大提质粒和小提质粒的基本原理是一样的，都是通过一定的方法（如加碱裂解）使在细菌内大量扩增的质粒释放出来，然后经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化DNA，最终将DNA提取出来。区别：1.大提用于大量菌液的提取，100ml-500ml 均可，而小提用的菌液量很少，一般1.5-5ml。2.一般试剂盒中大提比小提多了溶菌酶、异丙醇（回收沉淀核酸）、含一定量PEG的氯化物（回收质粒DNA）及乙酸铵等，其作用及目的都是有利于细菌的裂解和质粒的纯化，所以大提的产物比小提的量多很多，而且纯度很高。3.小提一般用于质粒鉴定和对纯度要求不是很高的实验，大提用于质粒的大量提取和转染等纯度要求很高的实验。
质粒转化后得到的阳性克隆有哪些方法可以鉴定？并说明鉴定的依据。 1 菌落PCR。设计引物扩增质粒特有的目的片段，如果阳性克隆里面有改片段，则说明转化成功。2 快抽质粒。将阳性菌落划平板，几个小时后，富集菌，然后快速抽提。看质粒大小有没有插入目的片段。3 提质粒，酶切鉴定。4 提质粒测序。1，2 都是早期的快速鉴定，假阳性高；3，4慢，但是比较确信。一般组合来用。
为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后，酶切鉴定正确，而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢？着急
如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量 用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒DNA。琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide，EB)，在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带，在电场中，pH8.0条件下，凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。扩展资料：质粒DNA提取方法1，碱裂解法2，煮沸裂解3，羟基磷灰石柱层析法4，质粒DNA释放法5，酸酚法等。选择哪一种方法取决于以下几个因素1，质粒的大小2，大肠杆菌菌株3，裂解后用于纯化的技术和实验要求参考资料来源：-质粒DNA纯化
质粒小量提取跟大量提取有什么区别 区别2113：1、所需菌液不同。大提用于大量菌液的提取5261，100ml-500ml 均可，而小提用的菌液量4102很少，一般16531.5-5ml。2、纯度不同。一般试剂盒中大提比小提多了溶菌酶、异丙醇（回收沉淀核酸）、含一定量PEG的氯化物（回收质粒DNA）及乙酸铵等，其作用及目的都是有利于细菌的裂解和质粒的纯化，所以大提的产物比小提的量多很多，而且纯度很高。3、实验要求不同。小提一般用于质粒鉴定和对纯度要求不是很高的实验，大提用于质粒的大量提取和转染等纯度要求很高的实验。扩展资料：大提质粒和小提质粒的基本原理是一样的，都是通过一定的方法（如加碱裂解）使在细菌内大量扩增的质粒释放出来，然后经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化DNA，最终将DNA提取出来。选用质粒（最常用）做载体的4点要求：1）选分子量小的质粒，即小载体（1－1.5 kb）→不易损坏，在细菌里面拷贝数也多（也有大载体）；2）一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束，一般 10 个以上的拷贝，而严谨型质粒个。3）必需具备一个以上的酶切位点，有选择的余地；4）必需有易检测的标记，多是抗生素的抗性基因，不特指多位 Ampr（试一试）。无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，然后采用适当。
质粒提最及酶切鉴定实验方法步骤 随便买一个试剂盒就可以提质粒，酶切的话只要买些酶就ok了|随便买一个试剂盒就可以提质粒，酶切的话只要买些酶就ok了
