DNA琼脂糖凝胶电泳出现拖尾的原因是什么 电泳出现拖尾现象2113,英文成为smear,就是5261弥散.其原因,主要从以下两4102个方面考虑:1、PCR产物1653自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度.2、电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.(3)电压太高.(4)适当把你的胶的浓度加大.(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照.以前有挺多人问过这个问题了 借用下以往问题的最佳答案
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾 由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶;减少dNTP的浓度;适当降低Mg2+浓度;增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。琼脂糖的熔点在62?65°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的分离。扩展资料:琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下,它的结构是稳定的,可以在许多条件下使用(如水,pH4-9范围内的盐溶液)。琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化,也不能高压消毒,可用化学灭菌活处理。把琼脂糖,即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂,溶于热水,冷却制成的凝胶。制成的小颗粒用于凝胶过滤。参考资料来源:-琼脂糖凝胶
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾? 看里的答案里提到PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退…
全基因组DNA跑胶拖尾 如果连MAKER都没有跑开,那就应该是胶的问题了.先把胶做好了再跑试试看 1%的琼脂糖凝胶跑DNA应该是可以的我感觉可能1 胶放置的时间不够 还没有完全凝固 因此跑的乱2.做胶的时候琼脂糖是否已经完全溶解了再倒的板子?这两个可能性最大
跑dna电泳出现拖尾现象,不知道为何?
DNA拖尾现象是什么原因 原因有以下:1、可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。2、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;3、可能是原液浓度太大造成的;4、可能DNA已降解。5、在提取前对样品进行一定的脱腐处理呀。很简单。有一种TENP buffer,文献中查的到的。6、DNA降解避免核酸酶污染。7、DNA上样量过多,可以减少凝胶中DNA上样量。8、所用电泳条件不合适,可以将电泳时电压不应超过20V/cm,温度℃,巨大DNA链,温度应℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。9、DNA样含盐过高,可以在电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。10、有蛋白污染,可以采用电泳前酚抽提去除蛋白。11、DNA变性,电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA
全基因组DNA跑胶拖尾 如果连MAKER都没有2113跑开,那就应该是胶的问题了。先把5261胶做好了4102再跑试试看 1%的琼脂糖凝胶跑DNA应该是可以1653的我感觉可能1 胶放置的时间不够 还没有完全凝固 因此跑的乱2.做胶的时候琼脂糖是否已经完全溶解了再倒的板子?这两个可能性最大