植物基因组DNA提取的相关问题，希望专业人士解答~~谢谢 1.加入细胞提取液后，为什么要65度水浴锅保温20分钟？不知道你用的是什么方法CTAB？细胞提取液成分能否说明？2.70%乙醇洗涤沉淀3次有什么用啊？去掉提取的DNA里面的的杂质，毕竟你前面的好多操作引入了很多的化学成分，有的会影响后续操作。洗涤两次就行了。3.TE缓冲液可不可以用水代替？可以用水代替，但是TE成分中的EDTA可以中和溶液中的金属离子，使核酸酶无法起作用，并且TE缓冲液是PH在8左右，此时DNA为盐离子状态，更容易溶于水，从而如果是从柱子上洗脱DNA的话，可以多洗脱下来的。
基因组DNA制备过程中提取缓冲液有哪些成分，作用是什么？ 主要成分是：NaCl，Tris-HCl（PH=8），EDTA（PH=8），SDS.NaCl，Tris-HCl主要是调节溶液的PH，维持一定的离子浓度.EDTA主要是二价金属离子的螯合剂，使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合，使酶失去活性，有利于提.
简述CTAB法提取植物基因组总DNA的原理 水相与氯仿之间有类似白色的膜，那说明上次抽提的还不是很干净，里面有蛋白之类的杂质。1、你可以再抽提一次，杂质肯定会减少；2、吸样的时候小心点，不要全吸了，动作轻柔点，不要猛吸，否则杂质也会没吸的。如果是叶片的话，用液氮冷冻，转速、时间每个仪器都会有些不同，我用的thmorganck1000组织研磨仪是5mm钢珠，1200，2min，水稻叶的。一般水稻种子、棉花籽之类的，就干磨就可以了，研磨后的粉末不建议加裂解液后再磨，我试过，这样在异丙醇析出dna时，dna是断裂的。研磨后最好加裂解液动作快点，尤其是富含酚之类的样品，裂解液中加些pvp40，巯基乙醇之类的抗氧化剂，否则dna会回火星上去的。
基因组DNA提取中细胞裂解液怎么配制？ 二、化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）主要是裂解液处理法，细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层，破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性.主要根据不同的目的，裂解液的组成有所不同，主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时，我们主要是要充分裂解细胞，得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白，那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液，在提取蛋白后，再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：50mMTris-HClpH7.4（缓冲体系），150mMNaCl（等渗体系），1mMPMSF（强大的蛋白酶抑制剂），1mMEDTA（变性剂和稳定剂），5μg/mlAprotinin（蛋白酶抑制剂），5μg/mlLeupeptin（蛋白酶抑制剂），1%Tritonx-100（破坏细胞），1%Sodiumdeoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂），0.1%SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）.7M尿素，2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解），蛋白酶K等.建议直接买试剂盒提取DNA，简单快速，成功率又高，省得麻烦
植物基因组DNA提取怎么做？ 植物组织提取基因组DNA一、材料幼嫩叶子。二、设备移液器，冷冻高速离心机，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，50ml离心管（有盖）及5ml和1.5ml离心管，弯成钩状的小玻棒。三、试剂1、提取缓冲液Ⅰ：100mmol/L Tris·Cl，pH8.0，20mmol/L EDTA，500mmol/L NaCl，1.5%SDS。2、提取缓冲液Ⅱ：18.6g葡萄糖，6.9g二乙基二硫代碳酸钠，6.0gPVP，240ul巯基乙醇，加水至300ml。3、80：4：16/氯仿：戊醇：乙醇4、RnaseA母液5、其它试剂：液氮、异丙醇、TE缓冲液，无水乙醇、70%乙醇、3mol/L NaAc。四、操作步骤：1.在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液Ⅰ，60℃水浴预热。2.幼苗或叶子5-10g，剪碎，在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中，剧烈摇动混匀，60℃水浴保温30-60分钟(时间长，DNA产量高)，不时摇动。3.加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液，颠倒混匀(需带手套，防止损伤皮肤)，室温下静置5-10分钟，使水相和有机相分层(必要时可重新混匀)。4.室温下5000rpm离心5分钟。5.仔细移取上清液至另一50ml离心管，加入1倍体积异丙醇，混匀，室温放置片刻即出现絮状DNA沉淀。6.在1.5ml eppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出DNA絮团，在干净吸水纸上吸干，转入含TE的离心管中，DNA很快溶解。
75%乙醇，在植物基因组dna的提取试验中什么作用 同物（植物、物、微物）基组DNA提取所同；同种类或同种类同组织其细胞结构及所含同离差异提取某种特殊组织DNA必须参照文献经验建立相应提取，获用DNA尤其组织糖酶类物质随酶切、PCR反应等较强抑制作用，用富含类物质材料提取基组DNA，应考虑除糖酚类物质本实验水稻幼苗材料，习基组DNA提取般DNA材料水稻幼苗二、设备移液器冷冻高速离机台式高速离机水浴锅陶瓷研钵50ml离 管（盖）及5ml1.5ml离管弯钩状玻棒三、试剂1、提取缓冲液？100mmol/L Tris？Cl，pH8.0，20mmol/L EDTA，500mmol/LNaCl，1.5%SDS2、提取缓冲液？18.6g葡萄糖6.9g二乙基二硫代碳酸钠6.0gPVP240ul巯基乙醇加水至300ml3、80：4：16/氯仿：戊醇：乙醇4、RnaseA母液：配见第章5、其试剂：液氮、异丙醇、TE缓冲液水乙醇、70%乙醇、3mol/L NaAc四、操作步骤：（）水稻幼苗或其禾木科植物基组DNA提取1.50ml离管加入20ml提取缓冲液？60？水浴预热2.水稻幼苗或叶5-10g，剪碎，研钵加液氮磨粉状立即倒入预热离管，剧烈摇混匀，60？水浴保温30-60钟(间，DNA产量高)，摇3.加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液，颠倒混匀(需带手套，防止损伤皮肤)室温静置5-10钟，使水相机相层(必要重新混匀)4.室温5000rpm离5钟5.仔细移取清液至。
如何从植物组织中提取基因组dna 不同生物（植物、动物、微生物）的基因组DNA的提取方法有所不同；不同种类或同一种类的不同组织因其细胞结构及所含的成分不同，分离方法也有差异。在提取某种特殊组织的DNA时必须参照文献和经验建立相应的提取方法，以获得可用的DNA大分子。尤其是组织中的多糖和酶类物质对随后的酶切、PCR反应等有较强的抑制作用，因此用富含这类物质的材料提取基因组DNA时，应考虑除去多糖和酚类物质。本实验以水稻幼苗为材料，学习基因组DNA提取的一般方法。DNA一、材料水稻幼苗二、设备移液器，冷冻高速离心机，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，50ml离 心管（有盖）及5ml和1.5ml离心管，弯成钩状的小玻棒。三、试剂1、提取缓冲液？100mmol/L Tris？Cl，pH8.0，20mmol/L EDTA，500mmol/LNaCl，1.5%SDS。2、提取缓冲液？18.6g葡萄糖，6.9g二乙基二硫代碳酸钠，6.0gPVP，240ul巯基乙醇，加水至300ml。3、80：4：16/氯仿：戊醇：乙醇4、RnaseA母液：配方见第一章。5、其它试剂：液氮、异丙醇、TE缓冲液，无水乙醇、70%乙醇、3mol/L NaAc。四、操作步骤：（一）水稻幼苗或其它禾木科植物基因组DNA提取1.在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液？60？水浴预热。2.水稻幼苗或叶子5-10g，剪碎，在研钵。
植物基因组dna的提取中为什么要用热的缓冲液 主要成分是：NaCl，Tris-HCl（PH=8），EDTA（PH=8），SDS.NaCl，Tris-HCl主要是调节溶液的PH，维持一定的离子浓度.EDTA主要是二价金属离子的螯合剂，使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合，使酶失去活性，有利于提取完整DNA；SDS主要是和蛋白质结合，使其变形沉淀，从而利于DNA的提取，减少和清除带白质杂质。
植物基因组DNA提取与其他生物基因组DNA提取有何主要的异同 植物基因组2113DNA提取与其他生物基因组5261DNA提取有何主要的异同质粒DNA提取一般用沸水4102浴法和1653碱裂解法，现在一般都采用碱裂解法，并有试剂盒可用，它主要是将细胞内的环状质粒提取出来，一般需要用SDS裂解，RNA酶降解，然后过柱，再进行洗脱.过程比较简单.而基因组DNA提取则较为复杂，也需要用SDS裂解和RND酶降解，但降解时间较长，同时对有些革兰氏阳性细菌还要进行溶菌酶处理，最后用氯仿-苯酚进行除蛋白，这一步重复进行多次，在用氯仿除去多余的苯酚，用乙醇清洗烘干后溶于TE缓冲液中，整个过程比提质粒更复杂，耗时也更多.
