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如何养293、293T系列的细胞? 30cm2皿接种细胞密度

2021-04-26知识1

96孔细胞培养板每孔的使用面积是多少 各培养62616964757a686964616fe59b9ee7ad9431333330346537器皿的面积、培养液量及细胞量分列如下:

如何养293、293T系列的细胞? 将细胞培养瓶竖立放置,吸走培养基,如果培养基中的脱落细胞较多,说明细胞现在很容易脱落,只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%),来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落,加入10mlMEM,混匀,不能吹打,分装2瓶。如果细胞没长满就脱落,则只需加入5mlMEM,不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固,培养基上清没有细胞脱落碎片,且细胞长满达到80%以上,吸走培养基,加入5ml的PBS+EDTA(0.02%),迅速轻微晃动,竖立培养瓶,吸走,加入1ml0.05%胰酶,37度消化不超过3min。扩展资料:注意事项:1、尽量用早期的细胞,传代太多状态不好,产毒也不好,贴壁困难。2、塑料的瓶子,DMEM+10%的小牛血清即可,要求并不高,ATCC上有详细的培养方法。3、主要是传代,胰酶消化点到即止,不能和其它成纤维细胞一样。4、细胞代数越高生长越快,同时性状和原代差别也更大。一般2-3天传代一次比较合适。5、传代时细胞密度在80%左右比较好,如果超过90%融合再传会影响细胞状态。参考资料来源:-293细胞

用显微镜观察细菌的步骤? 一、用脏手上的细菌制装片:1、收集手上细菌,用少量无菌水(可用冷开水代替)冲洗脏手,32313133353236313431303231363533e59b9ee7ad9431333431373237让洗手的水流到培养皿中。这些脏水就是细菌培养液。2、制取细菌装片,取甲、乙两块洁净的载玻片,分别在两玻片的中央各滴一小滴细菌培养液;然后在甲片上盖好盖玻片后直接用600倍的显微镜观察。(用稍偏暗的视野,调节到位可以看到多种细菌和其它微生物。很容易看到活动的微生物,这样对儿童更有吸引力和教育意义。如果你想进一步放大并会操作,选定观察的物象后,可把此物象移到视野正中央,再转换更高倍数的镜头观察即可。3、在乙片的细菌培养液滴上滴一小滴龙胆紫染色液,用牙签将细菌培养液和龙胆紫液搅匀、并将液滴推开,再用酒精灯加热液滴(约5秒钟)后让它自然晾干(约5分钟)。再用600倍的显微镜直接观察,既可以看到染成深蓝色的多种细菌和其它微生物。不过此时看到的微生物都已死亡、并被固定,因此看不到它们的活动状态。二、制取洗手后的对照装片。1、洗手-将手用香皂洗干净,用洁净的干毛巾揩干手;2、收集细菌培养液-用少量无菌水冲洗双手,让洗手液流入洁净的培养皿中;3、制细菌装片-制片过程。

#30cm2皿接种细胞密度

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