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反相液相死时间计算 何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点?

2021-04-23知识2

高效液相出峰有前沿峰是怎么回事?如何消除前沿峰?回答的越详细越好。 前沿峰 1柱温低2样品溶剂使用不当-当样品溶剂的洗脱能力大大强于流动相时会出现前沿峰。例如,在反相色谱中用已腈做样品溶剂,而流动相的洗脱力较弱时会出现前沿峰。3柱。

何为正相色谱及反相色谱?在应用上有何特点? 正相色谱基2113本上可以看作液固吸附色谱。其柱填料为5261吸附剂,表4102面有活性吸附点。溶剂和溶质1653分子可以吸附在活性中心。反相色谱是流动相极性大于固定相极性的色谱。反相色谱的应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,它能分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾体、脂类、脂肪酸、碳水化合物、生物碱等含有非极性基团的物质。正相色谱法的应用特点:全多孔型的微球型或无定型硅胶,然而,球形硅胶更适合于有效分离。用球形硅胶填充的正相柱具有较好的渗透性、较低的操作压力和较好的稳定性。扩展资料:反相色谱中最常用的有机溶剂有甲醇和乙腈。此外,乙醇、四氢呋喃、异丙醇和二氧六环等常用作改性剂。有机溶剂的梯度也会影响分辨率。梯度越小,分辨率越大。正相色谱的保留机理类似于吸附过程。极性样品分子和溶剂分子吸附在柱填料表面的极性基团(吸附剂)上。对于常用于正相的氰基、氨基或二醇基固定相柱,吸附中心通常为键合配体或硅烷。在使用硅胶时,吸附位点为硅烷醇(一SiOH)。参考资料来源:-反相色谱参考资料来源:-正相色谱

HPLC怎么计算死时间,C18柱是什么类型的柱子?化学键合?离子交换?还是什么的?是全多孔固定相还是非多孔固定相? 1.在HPLC分析中,死时间Tm表示了一个在高效液相色谱固定相上未被滞留组分的保留时间,由于高效液相色谱立法的多样性,很难找到像气相色谱那样选择空气或甲烷为测量死时间的。

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