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DNA聚合酶1生物活性 DNA聚合酶具备几种活性?用途是什么?

2021-04-09知识3

原核生物和真核生物的DNA聚合酶有何不同? 总体而言:1.真核细胞有5种DNA聚合酶,分别为DNA聚合酶α(定位于胞核,参与复制引发具5-3外切酶活性),β(定位于核内,参与修复,具5-3外切酶活性),γ(定位于线粒体,参与线粒体复制具5-3和3-5外切活性),δ(定位核,参与复制,具有3-5和5-3外切活性),ε(定位于核,参与损伤修复,具有3-5和5-3外切活性).2.原核细胞有3种DNA聚合酶,都与DNA链的延长有关.DNA聚合酶I是单链多肽,可催化单链或双链DNA 的延长;DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关;DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶.具体而言:(1)原核生物DNA聚合酶DNA聚合酶Ⅰ.在随从链合成时,先合成了许多冈崎片段,而后由于RNA引物的去除形成了空隙,此时DNA PolⅠ它催化聚合反应,延长了各个片段,从而填补了片段间的间隙,使以上片段得以靠近,为片段连接成长链创造了条件.所以DNA polⅠ的聚合作用主要是在填补随从链片段间空隙上发挥作用.DNA PolⅠ还具有3′5′外切酶活性可识别并去除错误的碱基.这种活性在DNA复制中起了校对功能.DNA PolⅠ的校对活性对DNA复制的准确性起着重要作用.DNA PolⅠ还具有5′3′外切酶活性.5′3′外切酶活性也有修正错误的功能,补充其3′5′外切酶。

DNA聚合酶具备几种活性?用途是什么? [1]聚合作用:在引物RNA'-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚e68a843231313335323631343130323136353331333330353437合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3'-OH与5'-PO4结合生成磷酸二酯键。若是错误的核苷酸进入结合位点,则不能与模板配对,无法改变酶的构象而被3'-5'外切酶活性位点所识别并切除之。[2]3'→5'外切酶活性─校对作用:这种酶活性的主要功能是从3'→5'方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸。当反应体系中没有反应底物dNTP时,由于没有聚合作用而出现暂时的游离现象,从而被3'→5'外切酶活性所降解。如果提高反应体系的温度可以促进这种作用,这表明温度升高使DNA生长链3'末端与模板发生分离的机会更多,因而降解作用加强。当向反应体系加入dNTP,而且只加放与模板互补的上述核苷酸才会使这种外切酶活性受到抑制,并继续进行DNA的合成。由此推论,3'→5'外切酶活性的主要功能是校对作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3'→5'外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。。

原核生物的三种DNA聚合酶有何共同特征和区别? 首先,原核生物DNA聚合酶分为Ⅰ2113,Ⅱ,Ⅲ。5261一、共同特征1、具有41025’→3’聚合酶活性,这就决定了DNA只能沿着5’→3’方向1653合成;2、需要引物,DNA聚合酶不能催化DNA新链从头合成,只能催化dNTP加入核苷酸链的3'-OH末端。因而复制之初需要一段RNA引物的3’一OH端为起点,合成5’→3’方向的新链。二、区别:1、DNA聚合酶I是单链多肽,可催化单链或双链DNA 的延长;2、DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关;3、DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多,是促进DNA链延长的主要酶.功能扩展资料:DNA聚合酶分类:1.大肠杆菌DNA聚合酶I大肠杆菌DNA聚合酶I是大肠杆菌polA基因编码由1000个氨基酸残基组成的单链多肽,具3种酶活性:5’→3’DNA聚合酶活性;5’→3’及3’→5’外切核酸酶活性。2、Klenow聚合酶(Klenow大片段)大肠杆菌DNA聚合酶I的3个结构功能域分别对应着3种不同酶活性。氨基端(1~326)具5'→3’外切酶活性;中间区域(326~542)具3'→5’外切酶活性;羧基端(543~928位)具5’→3’DNA聚合酶活性。枯草杆菌蛋白酶可将大肠杆菌DNA聚合酶I水解成大小2个片段:N端小片段包含1~326位残基,具5’→3’外切酶活性;而C端大片段包含。

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