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从平板接到三角瓶接种

2020-07-17知识11

微生物实验平板制作方法 (1)培养基的营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。分为液体培养基和固体培养基。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板平板划线法的步骤 1.融化培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。2.倒平板:待培养基冷却至50℃左右,按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1),平置,待凝固。倒平板的方法:右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出,试管或瓶口保持对着火焰;然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完,管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝,迅速例入培养基约15m1,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即为平板。3.作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右(平板转动一定角度约60℃),以便充分利用整个平板的面积,而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行,并可避免此两区线条相接触。4.划线操作(1)挑取他含菌样品:选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量菌种。(2)划A区:将平板倒置于煤气(酒精)灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面,有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上,仍留在煤气请问如何将固体斜面培养基上的大肠杆菌菌种配制成菌悬液? 先配制100Lm生理盐水,加入250m三角瓶中,再在其中加入20粒左右玻璃珠,高压灭菌。然后用接种环将斜面上的菌苔刮下,接入三角瓶中,一般接1-2环即可。或者用少量的无菌生理自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离筛选出这种酵母菌。请回答: (1)获得微生物纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。实验室筛选微生物的原理是提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物生长。制备的酵母菌培养基在进行培养基倒平板培养后怎样划线分离 平板划线法分离菌种实验步骤1、融化培养基将装有伊红美蓝琼脂培养基的三角瓶放入热水浴中加热至沸,直至充分融化。2、倒平板待培养基冷却至50℃左右后,按无菌操作法倒平板(每皿约倒15ml),平置,待凝。操作方法:右手持盛培养基的三角瓶置火焰旁边,用右手手掌和小指将瓶塞轻轻地拨出,瓶口保持对着火焰;然后左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一条稍大于瓶口的缝隙,迅速倒入培养基约15ml,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即为平板。3、作分区标志(操作熟练后此步骤可省略)在皿底用记号划分成4个不同面积的区域,使A,且各区的夹角应为120°左右,以便使D区与A区所划出的线条相平行、美观。4、划线操作1)挑取菌样:选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量含菌试样。2)先划A区:将平板倒置于酒精灯火焰旁,用左手取出平板的皿底,使平板表面大致垂直于桌面,并让平板面向火焰。右手持含菌的接种环,先在A区轻巧地划3~4条连续的平行线当作初步稀释的菌源。烧去接种环上的残余菌样。3)划其余区:将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下,并使B区转至划线位置,把接种环通过A区(菌源区)而移至B区液体培养基接种为什么不能把接种环直接放到培养基中 接种斜面一般用接2113总勾比较好,无菌环5261境下进行.在无菌环境下,一般就是在超净工作4102台里,或用气雾1653消毒剂等熏蒸过的接种箱里接种.一、在无菌环境里点燃酒精灯;二、把要接种的斜面和要接种的液体培养基(一般是液体三角瓶)外表面用医用酒精棉消毒准备好;三、把斜面拿在手上,接种勾烧到红,拔开试管塞,接种勾塞到试管里面冷却;四、为加快冷却的速度,可以把接种勾放到斜面的末端,待接种勾完全冷却后,把末端的斜面舍去;五、把剩余的培养基用接种勾分割成均匀的小块;六、打开液体培养基的封口,可以选择把分割好的菌块一块一块地接到里面,也可以选择直接用勾子把菌块扒到液体培养基里;七、接种塞紧液体培养基的封口,赛上试管塞,给接种勾消毒准备下次使用.试管斜面保存的菌种怎样接种到三角瓶中进行摇瓶发酵 试管斜面保存的菌种经过活化后在无菌条件下挑取适量菌种放到摇瓶内,塞好棉塞,25度左右静置48小时,然后开机振荡(摇晃)根据品种,振荡培养3-5天

#试管#固体培养基

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