平板菌落计数法基本原理 平板菌落计数的原理是什么？它适用于哪些微生物的计数

试比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点 微生物显微镜直接计数法随机性大，所以对菌体数量不能做出较为宏观，全面的反应.显微镜直接计数法一般与血球计数板配套使用.但显微镜直接计数法的优点是快速，观察到马上可以计数.平板菌落计数法最大的缺点是速度慢，需要平板上长出菌落一段时间后才能计数.但是由于平板菌落计数法通常做梯度稀释，所以计数的线性范围大.由于是菌悬液涂布，所以比较均匀，能较好的反应菌落的疏密程度.重复性，平行性很好，是经典的计数方法.平板菌落计数法的说明 1．操作方2113法：以无菌操作取5261检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液4102的灭菌玻璃瓶内（瓶1653内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨制成1：10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。2．无菌操作：操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的，不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落。3．采样的代表性：如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。4．样品稀释误差：为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释。比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点急。微生物显微镜直接计数法随机性大，所以对菌体数量不能做出较为宏观，全面的反应.显微镜直接计数法一？要使平板菌落计数法准确，需要掌握那几个关键操作？为什么？ 1 无菌操作2 稀释良好，不会太浓或太稀。3 菌落生长时间控制好，不会长的太大不便区分，也不至于太小影响计数。平板菌落计数法的菌落总数介绍 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：271087178平板菌落计数法（一）目的要求学习平板菌落计数的基本原理和方法。（二）基本原理平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可来自样品中的2～3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位(colony-formingunits，cfu)而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是，由于该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验(如活菌制剂)，以及食品、饮料和水(包括水源水)等的含菌指数或污染程度的检测。（三）器材1．菌种大肠杆菌菌悬液。2．培养基牛肉膏蛋白陈培养基。3．仪器或其他用具1mL无菌吸管，无菌平皿，盛有。平板菌落计数法有何优缺点 一、平板划线分离法 由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。二、稀释倒平板法 先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如 1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000…），然后分别取不同稀释液少许，与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。稀释涂布法：优点：可以计数，可以观察菌落特征。缺点：吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延。一般用于平板培养基的回收率计数！稀释混合平板法：优点：可以计数，吸收量为1ml，较方便。优点：不能观察菌落特征。一般用于菌落总数的计e799bee5baa6e997aee7ad94e59b9ee7ad9431333363373233数！平板划线法：优点：可以观察菌落特征，。平板菌落计数法操作步骤 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：雪中分平板菌落计数法一、目的要求学习平板菌落计数的基本原理和方法。二、基本原理平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散为e799bee5baa6e997aee7ad94e58685e5aeb931333433623830单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。现在常使用菌落形成单位。该计数法的缺点是操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是这种计数方法最大的优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验，以及食品、饮料和水等含菌指数或污染度的检测。三、器材大肠杆菌悬液，LB琼脂培养基，1mL、5mL无菌吸管，无菌平皿，无菌水，无菌试管，试管架和记号笔等。四、操作步骤1、编号取无菌平皿9套，分别标明为10-4、10-5、10-6各三套，另取6支无菌试管分别标记为10-1。

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