用紫外可见分光光度法测定苯甲酸 紫外-可见分光光度法测定苯2113甲酸5261离解常数pKa一、实验目的 1.掌握测4102定不同pH条件下的苯甲酸的吸光度并通过计1653算公式求算出它的离解常数的原理和方法。2.熟悉用紫外-可见分光光谱分析法在研究离子平衡中的应用。二、实验原理 如果一个化合物其紫外吸收光谱随其溶液的pH（即溶液中氢离子浓度）不同而变化，就可以利用紫外光谱测定其离解常数pKa，它的平衡式可表示为：Hin=H-+In-其中pH为：pH=Pka—log 或者：pKa=pH+log 若以pH对log 作图可以获得一条直线，当[In-]=[Hin]时其截距为离解常数pKa。绘制弱酸的紫外-可见光谱吸收曲线，在低、高两种pH状态时，若其溶液中含有指示剂，则可分别以In-和 Hin形式存在于溶液中，由两条吸收曲线就能方便的求出各自的λmax值，再配制成不同pH值的一系列指示剂溶液，于这两个λmax处测量它们的吸光度。可以通过实验测获它们在强酸、强碱、中性三类不同pH值介质中的稀溶液的吸光度，代入以下公式求出该化合物的离解常数pKa：=若以pH值为横坐标，吸光度为纵坐标作图，能获得两条S形曲线，该曲线中间所对应的pH值即为离解常数pKa。三、仪器和试剂 紫外-可见光谱仪（TU-1901，北京普析通用仪器有限责任公司生产），它的。
紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光度法的2113特点52611、与其它光谱分析方法相比，紫外可见4102分光光度法事物仪1653器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。二、紫外可见分光光度法的适用范围紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面，在许多领域更是必备的分析方法，例如食品等行业中的产品质量控制。扩展资料紫外可见分光光度法的注意点：1、准备操作仪器前，需要先查看一下指针仪器在断电的情况下，表面指针是否指向零刻度。如若不是，理应先调零然后才能连接电源。2、在使用的过程中，操作员应该尽量避免对镜灯的触碰，放大器使用过后，一定需要把档位归置到零。3、在操作紫外可见分光光度计时，操作人员需要留意一下机器的干燥剂。4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。参考资料来源：-紫外-可见分光光度法
紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同：（1）紫外分光光度计量程为200nm~600nm间，其中包括部分可见光。（2）可见分光光度计量程为320nm-1100nm，能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同：（1）紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。（2）可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同：（1）紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分，是结构和物质间相互作用的有效手段。（2）可见分光光度计采用低杂散光，高分辨率的单光束单色器，保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理：物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰，所以可用紫外分光。
紫外-可见分光光度法的基本原理 朗伯比尔定律，稀溶液中物质量浓度于其吸光度成正比1.基本原理单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，即朗伯-比尔定律，这是吸收光谱法定量的理论依据，其关系式如式 3-1：A=ECL 式(3-1)式中 A 为吸收度；E 为吸收系数，即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值；C 为溶液浓度；L 为液层厚度。紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。《中国药典》(2005 年版)有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价。其主要特点为：灵敏度高，可达 10-4 g/ml~10-7 g/ml；准确度高，相对误差为 2％~5％。中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分，在一定的浓度范围内，其溶液的吸收度与浓度符合朗伯-比尔定律，均可用此法进行分析。本法适于大类成分的含量测定，如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。2.定量测定法测定时，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用 1cm 的石英吸收池，在选（规）定的吸收峰波长±2nm 以内测试几个点的吸光度，或由仪器在选定波长附近自动扫描测定，以吸光度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸光度读数，以在 0。
紫外可见分光光度法与荧光光度法的区别 紫外可见分光光度法原理是根据被测物对特定波长处光吸收的多少来计算其浓度（含量）的；利用荧光光度计测定环境中某些物质的方法叫荧光光度法荧光计较之荧光分光光度计的概念来的大.
紫外可见分光光度法的主要组成部分有哪些？ 紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。②单色器[1]。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5～10厘米。④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
紫外可见分光光度计能测哪些指标 每种物质就有2113其特有的、固定的吸收光谱曲线，可5261根据4102吸收光谱上的某些特征波长处的吸1653光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。因此可以适用这个原理、并在紫外可见光分光光度计光谱检测范围的物质都可以使用紫外可见光分光光度计。常见的有以下几种：药物分析：《国家药典》可用紫外可见光分光光度法检测的药品，适用于药品检验、药物分析、制药等行业。生命科学：DNA、蛋白质的浓度。农牧渔：农药残留检测、作物成分检测、兽药检测、饲料检测、化肥检测、土壤成分检测、水产养殖检测等。地质勘探：矿石中金属元素和无机盐的测定。食品安全：添加剂、防腐剂、香料、脂肪、酶、糖类、香料、矿物质、维生素等的含量。环境监测：水质、大气、降雨及土壤等的监测，测定其中各类污染物的含量。
紫外可见分光光度法检测人工牛黄药典标准，【鉴别】1取胆红素〔含量测定〕项下溶液，照紫外-可见分光光度法通则0401测定，在453m波长处有最大吸收。
紫外-可见分光光度法的使用方法 《中华人民共和国药典》2005年版 第一部 附录VA（P附录28）：（1）波长 由于环境因素对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm，或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正，钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰，也可作波长校正用，但因来源不同或随着时间的推移会有微小的差别，使用时应注意。（2）吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，应符合表中的规定。波长/nm235（最小）257（最大）313（最小）350（最大）吸收系数的规定值 124.5 144.0 48.62 106.6 吸收系数的许可范围 123.0～126.0 142.8～146.2 47.0～50.3 105.5～108.5（3）杂散光的检查可按下页表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm。
最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：记忆_染成画紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry，UV-VIS)1定义：它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析，所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。2分类：按所吸收光的波长区域不同：分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。3、紫外-可见分光光度法的特点：（1)其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快；（与其它光谱分析方法相比）（2）灵敏度高；（3）选择性好；（4）精密度和准确度较高；（5）用途广泛。1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。2.有机化合物的紫外-可见吸收光谱2.1有机化合物的电子跃迁与紫外-可见吸收光谱有关的电子有三种，即。
