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载体酶切产物电泳时检测胶上有条带,回收胶上却降解了,请教各位大虾这是怎么回事? 胶回收时电泳槽不洗会怎样

2020-10-09知识17

载体酶切产物电泳时检测胶上有条带,回收胶上却降解了,请教各位大虾这是怎么回事? 一片亮,一般2113是样品处理或者配5261胶的时候不注意,混入了一些内切酶,或是4102电泳温度高1653,导致核酸降解,尤其是跑RNA电泳,很容易这样。建议用新胶,新TBC(TAC)重新跑一次,样品用醋酸铵重新纯化,电泳槽用缓冲液冲洗多次再用。另外可以在电泳槽周围放冰,降低电泳温度,并适当调低电压,因为高温对核酸降解也有促进作用。按你说的酶切结果清晰,回收反而降解,不是很常见,应该是混入内切酶的原因,另外,你也要检查一下回收胶的浓度。

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胶回收时溶胶温度设成95度 这样回收回来的产物还能没切吗 一片亮,一般是样品处理或者配胶的时候不注意,混入了一些内切酶,或是电泳温度高,导致核酸降解,尤其是跑RNA电泳,很容易这样。建议用新胶,新TBC(TAC)重新跑一次,样品用醋酸铵重新纯化,电泳槽用缓冲液冲洗多次再用。另外可以在电泳槽周围放冰,降低电泳温度,并适当调低电压,因为高温对核酸降解也有促进作用。按你说的酶切结果清晰,回收反而降解,不是很常见,应该是混入内切酶的原因,另外,你也要检查一下回收胶的浓度。

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凝胶电泳 电泳DNA时电压电流应该设置为多少。 看电泳槽多大,两电极2113直接的距5261离,每cm 3~5V。例如一个20cm的电泳槽,电压就应该设为410260~100V间。电压大,1653速度就快。还要考虑DNA长度,小片段DNA适宜用比较低的电压。DNA分子提取得到以后,需要通过电泳技术来检测其数量和质量。自从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶被引入核酸研究以来,按相对分子质量大小分离DNA的凝胶电泳技术,已经发展成为一种分析鉴定DNA分子的重要实验手段。琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是基因操作的核技术之一,它能够用于分离、鉴定和纯化DNA片段。扩展资料:凝胶的分辨能力同凝胶的类型和浓度有关,琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为0.2~50kb,而聚丙烯酰胺凝胶的分辨能力要高一些,能够分辨较小分子质量的DNA片段,其分辨范围为1~1000bp。凝胶浓度的高低影响凝胶介质孔隙的大小,浓度越高,孔隙越小,其分辨能力也就越强。反之,浓度降低,孔隙就增大,其分辨能力也就随之减弱。例如,20%的聚丙烯酰胺的分辨力可达1~6bpDNA小片段,而要分离1000bp的大DNA片段,则要用3%的聚丙烯酰胺的凝胶。2%的琼脂糖凝胶可分辨小到300bp的双链DNA分子,而对于较大片段的DNA,则要用低至0.3%~1.0%的琼脂糖凝胶。参考资料来源:-凝胶电泳参考。

电泳无DNA条带,什么原因?

DNA目的片段的回收方法有哪些 一、原理回收目的片段的方法很多,常用的有冻融法,低熔点琼脂糖法,透析代法、电泳回收法、玻璃孔回收法。可以看看 www.bio1000.com/zt/dna/164670.html 希望对你有帮助哦。

血清蛋白电泳时,为什么要把上层电泳槽接在负极上

琼脂糖凝胶电泳凝胶浓度是多少呢?

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