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提取DNA后为什么要跑胶 为什么跑质粒核酸胶会拖尾

2020-10-08知识17

开环质粒DNA和线性DNA哪个跑的快 线性DNA的电泳迁移速率比开环质粒DNA快。一、详细讲解如下:1、琼脂糖凝胶电泳DNA 迁移速率与分子大小和构象相关,分子构象越大,摩擦阻力越大,第一条带是超螺旋带应该最亮,因为超螺旋结构完整紧密,跑得最快。2、第二条带为线性质粒是双链都断开变成松弛的线性DNA,不如超螺旋紧密,跑得相对慢。第三条带为开环质粒,DNA双链的其中一根断开,导致超螺旋能量被释放而使质粒变成松弛的环状结构,结构臃肿,跑得最慢。3、由于摩擦阻力的问题,琼脂就像有孔海绵分子筛,细菌质粒提取中电泳会出现三条带,最快的是超螺旋带,它是完整的,因为它的构型紧密,跑得快。4、第二条带在中间,是线性带,即环状双链DNA 两条链均断开,其分子构象变为线性,不如超螺旋紧密,跑得就慢一点。最慢的是开环带,即环状双链DNA 有一条链断开,拖着一条尾巴,显得很臃肿,所以跑得最慢。二、参数理解:1、蛋白质和核酸会根据pH不同带有不同电荷,在电场中受力大小不同,因此跑的速度不同,根据这个原理可将其分开。电泳缓冲液的pH在6~9之间,离子强度0.02~0.05为最适。2、常用1%的琼脂糖作为电泳支持物。琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低。3、但。

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质粒跑电泳,拖尾很严重,是什么原因 提纯的纯度不够,就是杂质太多了。被打开的质粒跑的慢,完整的跑的快,建议上样少点,避免裂的过久。

提取DNA后为什么要跑胶 为什么跑质粒核酸胶会拖尾

提取的质粒跑电泳有两条带是怎么回事不知道你提的质粒应该是多大的?提取到的质粒可能出现三条带,最前面的是双链闭合环状的,其次是线状的,最后面的是会出现一些复制中间体.感觉2、4的带跟1、3中的任何一条都不同,如果24是酶切后的线性条带,那3前面那条和1就是闭环的,3后面的是复制中间体.后面的带'号的是什么?仔细看了下,124也是两条带,只是后面那条量少,不易观察。如果24是处理后的,我感觉前面那条带的电泳迁移率是有变化的,说明你用的化合物跟质粒有相互作用。质粒有两条带时不好准确判断是哪两条,建议你用个单一切点的酶处理一下质粒,也就是让它产生线状DNA,然后作为对照就知道样品里的两条带是哪两条了。

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为什么DNA质粒中的三种形态的电泳速度不同

为什么琼脂糖胶浓度越大,跑的是片段越小的质粒 一般来说,DNA片段越小,胶的浓度需要大些,原因就是胶的浓度越低,形成的孔径就越小,这样才能将各种不同小片段的DNA分离开来,并达到一定的精确度.分子生物学实验手册有对应的表格:

为什么在质粒电泳图上,根据DNA marker直接推断出的质粒大小是不可靠的? 是这样的,除了楼上所说的以外,不同的批次抽质粒,由于你最后把DNA 中的盐离子洗去的程度并不一样,这样…

#dna复制#质粒载体#dna提取#dna#电泳

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