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限制性内切酶的缓冲液有哪几种? 限制性内切酶分为几类

2020-10-05知识6

限制性内切酶有几类?各有什么特点

限制性内切酶的缓冲液有哪几种? 限制性内切酶分为几类

限制性内切酶有几类?各有什么特点 根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(Type I)、第二型(Type Ⅱ)及第三型(Type Ⅲ)。第一型限制酶同时具有修饰。

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限制性核酸内切酶有多少种?好像有几百 约4000种高中选修3现代生物工程技术第4页,第二段原话“切割DNA的工具是限制性核酸内切酶,又称限制酶。这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。迄今已从近300种不同的微生物中分离出了约4000种限制酶”

限制性内切酶的缓冲液有哪几种? 限制性内切酶分为几类

限制性内切酶的缓冲液有哪几种? 限制性内切酶的标准缓冲液包括氯化镁、氯化钠或氯化钾、Tris:HCl、巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)以及牛血清白蛋白(BSA)等。不同的限制性内切酶对NaCl浓度的要求不同,据此可分为高盐、中盐和低盐缓冲液,在进行双酶切或多酶切时,若这些酶可在同种缓冲液中切割效果良好,则几种酶可同时酶切;若这些酶所要求的缓冲液有所不同,可采用以下两种方法进行消化反应:先用要求低盐缓冲液的限制性内切酶消化DNA,然后补足适量的NaCl,再用要求高盐缓冲液的限制酶消化;先用一种酶进行酶切,然后用乙醇沉淀酶切产物,再重置于另一缓冲液中进行第二次酶切。

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