Western blot检测蛋白时用酶标仪设波长的问题 首先必须建立白蛋白(bovin serum albumin;BSA)之标准曲线,配置0.2,0.5,1,1.5mg/ml浓度的BSA,各取100μl于管中,另取一管加入100μl ddH2O当作blank,另外收集待测定量之不同浓度的VLPs fraction 100μl,加入5ml稀释过的Bio-rad protein assay试剂,混合均匀后,于室温下静置5分钟.测定595nm之吸光值,依各测定值可划出BSA之标准曲线,进而计算出欲测蛋白质之浓度.
在选择酶标仪时,应注意哪些? 在选择酶标仪时,应注意哪些,面对类型如此众多的酶标仪,实验室在选择时往往有难以适从的感觉,实验室在选择酶标仪时,一般应遵循这样几条原则
酶标仪测量波长的设定以什么为标准?如何设定?不是仪器操作,是试验设计 实验中波长的选择主2113要依赖于你要测的样品。样5261品在不同的波长下,对光的吸4102收值也不同1653,但都有一个吸收峰,一般选择吸收峰时的波长进行实验。比如同样是MTT法做细胞毒性实验,就有使用490nm和570nm两种波长选择,如果使用了DMSO作为试剂,在溶解后呈紫(红)色,在490nm有最大吸收值;而对于SDS和酸化异丙醇,则选用570nm(655nm作为参考波长)。酶标仪波长设定还要看你用的是什么酶标仪,如果是光栅式单色器(可以1nm步进调节),就可以直接设定吸收峰的波长;如果是滤光片式单色器,因为受滤光片波长限制,有时你就需要选接近使用波长的滤光片,比如655nm,你就可能选用650nm的滤光片。