针对高效液相色谱仪，在做含有缓冲液的流动相时，一般要冲多久的柱子？ 冲柱时间的长短，要看你的色谱柱。柱长决定bai流动相的缓冲时间。按照标准执行，需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验，通常会节省一些时du间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱，比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水（或乙腈水）zhi来过渡半小时，然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结束后用10%的甲醇水（或乙腈水）过渡半小时，然后用纯甲醇（或纯乙腈）保存色谱柱半小时。这样做的主要原因是，流动相中的缓冲盐不可以直接遭遇纯有dao机相。因为溶解度等原因，可能会出现盐析现象。所以会用甲醇水做过渡。你在冲流动相的时候可以观察基线，平衡后内就可以进样分析。但是冲洗色谱柱容的时候和基线没有关系。冲洗色谱柱主要是洗去色谱柱中残留的流动相和样品，避免他们对固定相，也就是你色谱柱的填料产生影响。
这个点有没有液相达人，请教一下流动相的盐浓度会有什么影响，急，非 第一是修饰峰型的。有2113些色谱峰拖尾5261或者前沿，如4102果流动相水相中加入了1653缓冲盐，这种情况会得到改善。第二就是可以令色谱峰更好的分离。缓冲液，顾名思义就是有缓冲的作用，比如一个物质的保留时间是6min，加入无机盐，他的保留时间可能会变成7min、8min等等。让这个物质在色谱柱里的停留时间变长。这样这个物质和其他的杂质的分离度就会改善。当然，也可能会起到反效果。第三，就是pH值。药物的保留时间和它的流动相的pH值有关系。比如一个碱性的药物，在酸性流动相里洗脱，酸性越大，药物的保留时间越靠前。标准文献的无机盐溶液都会告诉你，配制0.05mol/L，或者是0.1mol/L，这个时候你可以计算一下他们的pH值，这个条件下应该是分离最好的。
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么 sunmaocheng(站内联系TA)是不是在跑液相开始的时候，用磷酸钾缓冲液和纯乙腈先梯度洗脱？huanghaiyu(站内联系TA)只要盐完全溶解，一般不会有问题的，如果你确实很担心，就把乙腈和盐按照你的比例混合好，然后装在一个瓶子了，再进样品，这样就没问题了，使用完清洗的时候首先要用95%的水冲洗，避免残留.痴客(站内联系TA)以前用PB缓冲液和乙腈跑过，貌似没出过什么问题，但是后来老师说盐可能会堵柱子fisherme(站内联系TA)遇到过这样的问题，前一天有人用眼做流动相跑了，系统可能没有冲干净，隔天再用乙腈系统压力就会升高，甚至堵住.这明显是少量盐溶液在系统内有过量的乙腈会洗出盐结晶.\\x0d其实只要盐溶液和乙腈比例合适就不会存在析出的问题，关键是使用过后的后处理，也不能直接用100%水来冲，要有个缓冲.算不上经验，交流一下.lihuan0525(站内联系TA)最关键的就是使用后的及时冲洗.chene(站内联系TA)主要是要在用完后，耐心把柱子冲赶紧，这很重要，要不下次别人没法用的同时也耽搁你自己的使用。caozhanglei(站内联系TA)1.用前要用磷酸调PH值，使其达到所要求的PH值.\\x0d2.要现用现配，以免时间长缓冲盐析出和滋生细菌.\\x0d3.要一次配足，多次配的前后缓冲效果不一样，影响分离效果.\\x0d4.磷酸盐。
液相色谱的保留时间总是不稳定，该怎么解决？ ⑴温2113度控制不好，向前或向后单5261向漂移，解决方法是采用恒温装4102置，保持柱温恒定。1653⑵流动相组成发生变化，向前或向后单向漂移，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。⑶流动相未平衡好（如缓冲溶液或离子对试剂，尤其是低浓度的盐溶液），向前或向后单向漂移，需对柱子进行更长时间的平衡。⑷泵或者管路中有气泡，前后漂移，可通过排气等将气泡赶出。⑸泵单向阀中的宝石球磨损，造成流动相倒流，压力不稳定，保留时间前后漂移。解决办法是更换部件。⑹泵比例阀控制失灵，不同流路流动相比例不断变化，保留时间前后漂移。解决方法是更换部件。⑺泵活塞杆密封垫老化，流动相渗漏。解决办法是换密封垫。⑻在线混合器混合能力变差，不接梯度测试混合能力，并同手工配置流动相比较。⑼系统管路有堵塞，引起压力不稳，导致保留时间漂移。⑽吸滤头堵塞，流动相抽取受阻。清洗或更换吸滤头。⑾色谱柱样品超载，解决办法是减少进样量。⑿色谱柱键合的固定相流失，注意流动相pH值在容许范围。⒀硅胶填料的位点被活化，使用可修饰流动相，加三乙胺或使用碱灭活柱等。
流动相是盐溶液，昨晚样品后，用10%的甲醇水溶液冲洗半小时，这么高的含水量，对于柱子有危害吗？ 没有危害流动相的选择技巧常用做反相流动相的溶剂是甲醇和乙腈，甲醇有其性价比的优势，但是甲醇活性高，可能与某些样品发生反应，而且甲醇在低波长下有紫外吸收，会降低。
高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么 sunmaocheng(站内联系TA)是不是在跑液相开始的时候，用磷酸钾缓冲液和纯乙腈先梯度洗脱？huanghaiyu(站内联系TA)只要盐完全溶解，一般不会有问题的，如果你确实很担心，就把乙腈和盐按照你的比例混合好，然后装在一个瓶子了，再进样品，这样就没问题了，使用完清洗的时候首先要用95%的水冲洗，避免残留。痴客(站内联系TA)以前用PB缓冲液和乙腈跑过，貌似没出过什么问题，但是后来老师说盐可能会堵柱子fisherme(站内联系TA)遇到过这样的问题，前一天有人用眼做流动相跑了，系统可能没有冲干净，隔天再用乙腈系统压力就会升高，甚至堵住。这明显是少量盐溶液在系统内有过量的乙腈会洗出盐结晶。其实只要盐溶液和乙腈比例合适就不会存在析出的问题，关键是使用过后的后处理，也不能直接用100%水来冲，要有个缓冲。算不上经验，交流一下。lihuan0525(站内联系TA)最关键的就是使用后的及时冲洗。chene(站内联系TA)主要是要在用完后，耐心把柱子冲赶紧，这很重要，要不下次别人没法用的同时也耽搁你自己的使用！caozhanglei(站内联系TA)1.用前要用磷酸调PH值，使其达到所要求的PH值。2.要现用现配，以免时间长缓冲盐析出和滋生细菌。3.要一次配足，多次配的前后缓冲效果不。
高效液相色谱，流动相抽滤时，什么时候用有机系滤膜，什么时候用水系滤膜？ 过市场出售的水系膜是混合纤维素滤膜或者醋酸纤维素滤膜，有机系滤膜一般是PVDF(聚偏氟乙烯滤膜)和PTFE(聚四氟乙烯滤膜).用有机系滤膜是可以滤不含有机相的水或盐溶液的，。
