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紫外分光光度法检测dna 紫外可见分光光度计能测哪些指标

2020-09-30知识3

究竟紫外分光光度法测DNA浓度怎么算。。 这个,我测DNA浓度的时候只关注两个数值。一,A260/A280,如果在1.8+—0.2范围内,这就说明提取的DNA还比较纯净。最好是1.8二,浓度,37ug/ml就是37ng/ul,如果你是用1ml菌液小提的话,这个是低了很多。一般小提在100-200ng/ul吧

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电泳法和紫外分光光度法检测DNA的浓度和纯度,哪种方法更好 两种方法各有优劣。电泳法更直观,如果你有DNA Maker,并且知道Maker的浓度,就可以使用一维条带分析软件如Quantity One分析样品中DNA的含量,而且可以很直观地了解目的DNA的纯度、大小等特性。但是,由于电泳中染色特异性很强,对DNA、RNA之外的小分子污染情况无法检测。紫外法可对样品中所有具紫外吸收特性的物质给出一个综合的结果。因此如果样品中有其他影响DNA后续操作的物质,样品吸光值就会有很大偏移。值得注意的是,紫外法仅可作为一个参考,吸光值是结果,而不是原因。吸光值符合要求并不能代表DNA纯度符合要求。一般紫外分析后还是要跑个电泳,两者结合就可靠多了。

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紫外分光光度计法测DNA纯度纯度偏小的原因? 1.DNA发生了损失,比如降解(虽然很少)2.溶解DNA的溶液影响,水溶液的吸光低于tris中的吸光

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如何用紫外分光光度计测DNA浓度

用紫外分光光度法测定核酸有什么缺点 核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统(-C=C一C=C 一),能够强烈吸收250~280nm 波长的紫外光.核酸(DNA,RNA)的最大紫外吸收值在260nm 处.遵照Lambert-Beer 定律,可以从紫外光吸收值的变化来测定核酸物质的含量.在不同pH 溶液中嘌呤、嘧啶碱基互变异构的情况不同,紫外吸收光也随之表现出明显的差异,它们的摩尔消光系数也随之不同.所以,在测定核酸物质时均应在固定的pH溶液中进行.核酸的摩尔消光系数(或吸收系数),通常以ε(ρ)来表示,即每升含有一摩尔核酸磷的溶液在260nm 波长处的消光值(即光密度,或称为光吸收).核酸的摩尔消光系数不是一个常数,而是依赖于材料的前处理、溶液的pH 和离子强度发生变化.它们的经典数值(pH=7.0)如下:DNA 的ε(ρ)=6 000 8 000RNA 的ε(ρ)=7 000 10 000小牛胸腺DNA 钠盐溶液(pH=7.0)的ε(ρ)=6 600,DNA 的含磷量为9.2%,含1μg/mL DNA 钠盐的溶液光密度为0.020.RNA 溶液(pH=7.0)的ε(ρ)=7 700~7 800,RNA 的含磷量为9.5%,含1μg/mL RNA 溶液的光密度为0.022~0.024.采用紫外分光光度法测定核酸含量时,通常规定:在260nm 波长下,浓度为1μg/mL 的 DNA 溶液其光密度为0.020,。

如何用紫外吸收法测定DNA含量?

紫外分光光度计检测DNA最高值不在260,为什么 用紫外分光光度法对DNA进行纯度鉴定,由于核酸中碱基具有共轭双键,因此核酸具有紫外吸收的性质,其最高吸收峰在260nm处.

#紫外可见吸收光谱#dna提取#分光光度法

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