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菠萝蛋白酶提取,纯化,活性鉴定所用缓冲液ph不同,为什么? 碱性蛋白酶酶解缓冲液怎么配置

2020-09-25知识11

菠萝蛋白酶提取,纯化,活性鉴定所用缓冲液ph不同,为什么? 由于胶原是细胞外间2113质成分,在5261体内以不溶性大分子结构4102存在,并与蛋白多糖、糖蛋白等结合在一1653起,因此胶原的制备包括材料的选择、预处理、酸碱酶盐水法提取、不同类型胶原的分离和纯化。除胶原蛋白外,动物骨中还含有油脂、多种矿物质和其他杂质,因此在被用于提取胶原蛋白之前必须进行预处理。先剔除动物骨上残留的肉质和肌腱等杂物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油。最后除去骨中无机物以提高胶原蛋白的得率。除去骨中的矿物质可用稀酸或EDTA溶液。有人用原料用5倍质量的1.0moL/LHCL脱钙处理2d,用正乙烷脱脂后再用胃蛋白酶酶解,在加酶量150U/g,pH值1.7,37℃条件下处理120min,然后在固液比1∶6的情况下抽提5h,在此条件下,提取率可达18%;还有人用EDTA溶液(pH7.4)浸泡骨料5d,可有效脱去骨料中的羟基磷灰石。胶原蛋白的提取一般有三种方法:一是高压辅助的物理方法;二是用溶剂预处理结合低温或热水抽提的化学方法,根据溶剂的不同,可分为热水浸提法、酸法、碱法、盐法;三是用酶的生物化学法。一般来说,高压辅助和热水抽提针对明胶的提取,而低温抽提和酶法针对胶原的提取,但其基本原理都是根据胶原蛋白的特性改变蛋白质所在的外界。

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胰蛋白酶配制需要缓冲液吗? 样品是粗蛋白。胰蛋白酶工作条件为37度,PH8.5的微碱性环境,缓冲液使用25mM的碳酸氢铵即可,终浓度为0.01ug/ul

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哪位高手能告诉我,在PCR产物纯化中,蛋白酶K 的作用是什么,以及其原理 感激不尽啊!!!!!! 觉得应该是灭活Taq酶的,这2113个原5261理应该是比较清楚的,不赘述了4102。用EDTA的话,EDTA是广谱的螯合剂1653,可以和金属离子结合。在配制PCR的反应物时都会加入镁盐,因为镁是Taq所必须的,EDTA掠夺镁离子,也可以起到灭活Taq酶的作用。

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胰蛋白酶的作用是什么? 胰蛋bai白酶为肽链内切du酶,对精氨酸和赖zhi氨酸肽链具dao有选择性水解作用,可使天回然蛋答白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。由于血清中含有非特异性抑肽酶,故胰蛋白酶不会消化正常组织,而能分解黏痰、脓性痰等黏性分泌物,能促进抗生素、化疗药物向病灶渗透。胰蛋白酶主要用于:1、用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、娄管等所产生的局部水肿、血肿、脓肿。2、用于呼吸道疾患溶解黏痰和脓性痰。3;用于治疗毒蛇咬伤,曾试用于竹叶青、银环蛇、眼镜蛇、蝮蛇等毒蛇咬伤的各型病人800余例,均获治愈。扩展资料使用胰蛋白酶的注意事项1、不可作静注。用前需作划痕试验,应注意可能产生过敏反应。2、吸取注射液后应另换针头,以免注射时疼痛。3、外用时,可采用注射用制剂以缓冲液溶解,但必须在3小时内用毕。参考资料来源:_胰蛋白酶

蛋白酶的作用是什么 会员8123043 61 2015-03-24 23:54:50 我们单位平时的福利都非常的好,基本上每半年都会组织所有员工进行一次免费的体检。前天我们又开始去体检了,以前我的体检报告上都是。

PH值影响酶活力的原因有哪些? PH值对酶活性的影响有:PH偏小(呈酸性)或偏大(呈碱性)都会使酶蛋白变性而失活。PH值的改变会影响酶活性中心的必须基团的解离程度,同时还会影响底物和辅酶的解离程度,。

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