带有目的基因的质粒怎样导入受体细胞 目的基因修饰的质粒如何构建

表达质粒构建中，做带有目的基因片段的pcr之前，需要对带有目的基因片段的质粒进行酶切吗？。 目的基因PCR的时候两头引物就要设计酶切位点了，要不怎么连的上呢.然后用内切酶消化质粒和目的基因，电泳纯化，再用T4连上.省略构建重组质粒有何后果？...