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看家基因 单拷贝 基因表达丰度和基因丰度一样吗?

2020-08-12知识7

双标准曲线是什么意思 所谓相对定量是指在测定目的基因的同时测定某一内源性管家基因,该管家基因的作用有(1)用于核苷酸的拷贝数的比较;(2)作为内源性对照补偿待测样本的体积变异、核酸抽提过程中造成的目的基因变异,以及反映反应体系内是否存在PCR扩增的影响因素;(3)标准化标本。由于管家基因在各种组织中是恒定表达的,所以可以以管家基因的定量来作为某种标准以比较样本来源不同的目的基因表达量的差异。通常选用的管家基因有GAPDH、β-actin、β2-微球蛋白和rRNA,研究者也可以根据具体的需要而选定合适的管家基因。使用的相对定量较为早期的方法是用一系列已知外参物做标准曲线,根据该标准曲线得到目的基因和管家基因的量,再将目的基因的同管家基因的比值作为定量的最后结果。这一方法要求外参、目的基因和管家基因的扩增效率一致。标准曲线方法使用标准 RNA 样品,标准曲线通过梯度稀释制备,用来对目的基因和看家基因进行分析,结果数据被用来生成标准曲线和线性方程。看家基因的标准曲线由其 C t 值对 RNA 的量做图(Figure 2A)。而目的基因的标准曲线由其 C t 值对任意的表达倍数做图。要计算未知样品的相对表达量,首先通过看家基因的标准曲线求出总 RNA 量。然后目的基因的 。abi7500 quencher为什么 none 我们主要售荧光定量pcr,我们的工程师比较专业,您可以把问题描述的详细些,我问问我们的工程师。也可直接我的名,我尽快解决。也可以研读附件。ABI 7500荧光定量PCR仪技术参数一 技术参数1.可同时检测5色荧光,用于多重PCR检测2 激发光源:卤钨灯,使用寿命不低于2000小时,软件对光源进行实时监测,3 检测器:冷CCD成像系统,对96孔板同时成像,无时间差,保证结果的准确4 温度控制系统:半导体控温5 温度准确性≤0.05℃(95℃时),≤0.25℃(35℃-95℃范围内)6 温度控制范围:4℃~100℃7 动力学线性范围:9个数量级,区分5000和10000拷贝两倍差异浓度的样本,其致信度高达99.7%8 支持ROX或其它染料用做参比荧光,用于消除加样误差及监测反应体系是否蒸发。同时,软件支持无参比染料设置9 试剂开放,耗材开放,支持0.2ml的96孔板、8联管和单管10仪器性能有原厂装机试剂盒验证:能分辨1250、2500、5000、10000、20000拷贝数的初始模板标准品各4个重复验证线性准确度,36个重复的5000拷贝和36个重复的10000拷贝能以99.7%的置信度加以区分11 整个实验过程中,激发光源、检测器均无需移动12 样品体积:10-100μl(推荐20-50μl)13 灵敏度:能检测人类。内源基因在pcr检定转基因成分时起什么作用 建立一种利用TaqMan荧光PCR定量技术不依赖参比内源基因测定转基因植物外源基因拷贝数的分析方法。方法:以转基因大豆RRS和转基因玉米Bt176为材料,通过转基因植物外源基因与品系特异序列拷贝数的比较测定外源基因整合拷贝数。结果:3次测得的Bt176玉米中Cry1A(b)基因的整合拷贝数分别为2.69,3.43和2.83,平均为2.98,标准偏差(SD)为0.40,相对标准偏差(RSD)为13.28%,即Cry1A(b)基因在Bt176玉米中的整合拷贝数为3;3次测得的RRS大豆中EPSPS基因拷贝数分别为1.08,1.01,0.96,平均为1.01,SD为0.06,RSD为6.06%,即RRS大豆中EPSPS基因拷贝数的测定结果是单拷贝。结论:本研究建立的转基因植物外源基因拷贝数测定方法可准确测定转基因植物外源基因的拷贝数。与现有的通过外源基因与参比内源基因拷贝数比较测定转基因植物外源基因拷贝数的方法相比,不但避免了选择物种特异性的看家基因及测定看家基因拷贝数等大量工作,而且应用范围更广泛。肺癌患者诊后咨询:验血检查 问题: 肺癌患者诊后咨询中山大学附属肿瘤医院肿瘤内科马宇翔,医生处置方案:验血检查 问题:基因表达丰度和基因丰度一样吗? 基因表达的丰度是指基因转录成mRNA的数量。基因丰度是指基因组中该基因的拷贝数量。基因丰度高,即这个基因的数量多,那么可能这个基因的表达量也会多,但是不一定,主要还是要看该基因的启动子强弱。所以基因丰度高不代表表达丰度也高。基因表达丰度高是指该基因转录成mRNA多,那么表达的蛋白也多,对于表型的影响就大。这个够浅显了吧~怎么才能让狗狗长肉,要吃什么会长肉? 让狗狗长胖的方法如下:一、少吃多餐但不要增加每餐的饭量。因为身材消瘦的狗狗大多肠胃功能较弱,一餐吃得太多往往不能有效吸收,反而会增加肠胃负担,引起消化不良。可以把每天的进餐次数改为4~5餐。食物以易消化、高蛋白、高热量为原则,吃狗狗想吃的东西,以提高食欲。二、喂点零食、维生素、微量元素除了正规的用餐外,应该适量地吃些含有一定热量的零食。因为这类食物易令狗狗产生饱腹感而减少食物的摄入量。必要时可补充适量的维生素和微量元素。三、要注意控制脂肪的摄取,不要为了短时期的增肥效果而过多地食用油脂类食品,这样不会增重反而会造成冠心病等疾病。狗狗肥胖可能导致许多问题,包括心脏病、关节问题和糖尿病。尤其是比格、腊肠、巴塞特和拉布拉多。在您的狗狗到达需要注射胰岛素的底线之前,您可以让它瘦下来。这也许要花费一年的时间,但是绝对值得这样做。

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