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连续测定法测ALT吸光度值 为控制实验误差在0.2%到2%,测定的吸光度值应在什么范围

2021-04-28知识5

最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:kanghuany实验八、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性测定—赖氏法(比色法)目前测定ALT的方法主要有两大类:分光光度法(速率法)比色法(赖氏法)实验目的实验原e79fa5e98193e58685e5aeb931333433623830理实验步骤结果分析实验报告实验目的:熟悉ALT活性测定的方法掌握ALT活性测定的临床意义实验原理:红棕色丙酮酸2,4-二硝基苯腙的颜色深浅与丙酮酸的生成量成正比;反应体系中丙酮酸的量与血清中ALT的活性成正比。血清中ALT活性丙酮酸的生成量赖氏法(比色测定法)丙酮酸2,4-二硝基苯腙505nm处有强吸光度临床意义:ALT在肝、肾、心和骨骼肌中含量丰富,其中ALT在肝细胞中的浓度比血清高7000倍,且主要位于肝细胞的可溶性部分。当肝脏受损、肝细胞膜通透性增加时ALT或AST释放入血可导致血清中该酶活性增加,因此,ALT常用于肝脏疾病的诊断。主要应用于以下几种肝脏疾病的检测:急性病毒性肝炎;慢性活动性肝炎、脂肪肝、恢复期的急性病毒性肝炎患者;肝硬化、肝癌;由其它原因引起的肝脏损害等。实验步骤:1.ALT标准曲线绘制试剂(ml)/管号0.1mol/L磷酸盐缓冲液2.0mmol/L丙酮酸标准液ALT底物缓冲液2,4-二硝基苯肼溶液00.100。.

为控制实验误差在0.2%到2%,测定的吸光度值应在什么范围 对于较先进的紫外-可见2113分光光度计,5261T测量的绝对误差△T主要受4102检测器的散粒效应的影响1653,光电检测器噪声近似比例于信号强度的平方根,即△T=KT1/2(K为比例常数)。解得当T=0.135(A=0.86)时,测量的相对误差最小。由于先进仪器自身△T也较小,一般控制吸光度在0.1-2.0之间,就能保证测量精密度在0.5%之内。若读数超出上述范围,相对误差会迅速增大。与传统的0.434比较 对普及型和中等性能的分光光度计,T测量的读数误差△T主要受热噪声或电子噪声影响,不随T本身而变化,是一个常数,约在0.002~0.01的范围。解得 T=0.368,因此,当T=0.368(A=0.434)时,测量的相对误差最小。

紫外可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么? A=ECL C=A/ELA为吸收度;T为透光率;E为吸收系数,采用的表示方法是(E1%1cm),其物理意义为当溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸收度数值;C为100ml溶液中所含。

#连续测定法测ALT吸光度值

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