为什么不用mRNA作为实时荧光定量pcr的模板 RNA分子怎么能作为PCR模板呢？PCR的酶是DNA聚合酶，需要用DNA为模板！因此需要mRNA逆转录为cDNA，再以cDNA为模板才能进行PCR反应。
我做荧光定量PCR，结果是两个很近的双峰，其中一个峰是目的峰，不像二聚体，谁能帮帮我这是什么原因，谢谢 有非特异扩增。建议跑一个胶看看
荧光定量PCR 阴性对照曲线上扬为什么溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线，顾名思义，其跟模板（或其浓度）没有关系，扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线，类似于电泳。那么你扩增几种基因就应该有几种对应的峰（一般SYBR法的目的基因在80~90℃之间），我说的是一般情况，这个跟扩增片段长短有关系。出现其他峰就该考虑是否为引物二聚体（一般为60~75℃之间）视引物长度而定，而基因组DNA污染的峰会在90℃以后。出现引物二聚体可能是引物设计、引物加量等原因（也有可能是从加完反应液到上机开始PCR这之间的时间过长）所致；基因组DNA那么考虑设计跨内含子引物或者实验之前做gDNA的消除工作。而阴性对照有目的峰那可能就是模板污染，注意实验操作等避免模板污染。
