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液相色谱图中死时间 为什么做高效液相色谱图时,同一个样品,前后做出来的图谱很大程度上不一样呢,这是为什么?

2021-04-28知识2

死时间的色谱中的死时间 液相色谱死时间是指样品在整个色谱过程中完全不被保留、通过整个色谱系统所需要的时间。在色谱中测定死时间通常有两种方法,一是用所谓的无保留的探测物如尿嘧啶、某些无机盐等直接测定;二是根据同系物的保留时间用数学方法进行计算求取死时间。

为什么做高效液相色谱图时,同一个样品,前后做出来的图谱很大程度上不一样呢,这是为什么? 1、可能是你一开始的时候进样量不准确,使得再次进样时存在进样量的差别。2、仪器的差异,不要以为仪器就是准确的,会随着时间变化而变化,所以每用高效液相色谱仪要进行校正。3、如果样品是纯物质的话,就是你操作不正确;不如样品基质复杂或是样品不纯,建议用内标法,可以消除基质、仪器的影响。

如何分析高效液相色谱图 分析色谱2113图的方法:手动进样步骤 配置好流5261动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,4102打开泵和检测器,快1653跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定)。打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中,拔出针头好立刻关闭六通阀,一般随六通阀关闭电脑自动采样,等主峰跑完整后记录其峰面积,一般跑两个对照,每个对照跑两针,共四针。然后开始注称好溶配脱气后的样,以对照主峰的保留时间来判断样品中目标峰的位置,外标法以峰面积计算供试品中某物质的含量。X=[S样*K/m样(1-水分)]*对照品含量%*100扩展资料高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。⑤应用范围广:百分之七十以上。

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