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裂解试验炉 海关编码 hs code 高温试验炉进行高温裂解的过程

2021-04-27知识5

质粒DNA的提取实验报告 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:GloriaChang01质粒DNA的提取一、实验方法碱裂解法抽提质粒DNA二、实验原理基于质粒DNA与染色体DNA变性与复性的差异。三、实验步骤1)质粒提取1.10,000g,1min离心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml离心管中。2.加入100l溶液1,振荡至彻底悬浮。3.加入200l溶液2,立即轻柔颠倒离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置3分钟4.加入150l溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,10,000g离心10min。5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的苯酚/氯仿/异戊醇混合均匀10,000g离心5min。6.将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水乙醇,室温放置5-10min,沉降DNA7.10,000g离心10分钟,弃乙醇,保留沉淀,加入1ml70%的乙醇洗涤沉淀,10,000g离心5分钟8.倒掉乙醇溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量乙醇9.加入适量含RNase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA2)质粒鉴定琼脂糖凝胶电泳灌胶:胶中加入荧光染料(SYBRGreenI)加样:质粒+上样缓冲液混匀电泳结果观察:UV灯下四、实验结果五、实验分析裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因此用。

DNA实验室常用的DNA提取方法有哪些 提取DNA主要有SDS和CTAB法,其实提取效果的好坏主要看提取的对象是什么样的材料,在提取之前一定要好好分析材料的特性,然后在设计实验步骤。

噬菌体浸染实验中,离心和搅拌的作用分别是什么?上层是哪些物质(具体些),下层是哪些物质? 如果只是搅拌而不离心,的确也能分开,但是需要的时间长,细菌会裂解.不知道你有没有注意到教科书上的原话,这个实验一定要在“短时间”保温后搅拌、离心让噬菌体和细菌分开.搅拌和离心的目的是为了将噬菌体蛋白质外壳同侵入大肠杆菌的噬菌体DNA分开,以便对放射性元素跟踪测试.离心会使质量较轻的噬菌体颗粒进入上清液,而被感染的细菌则形成沉淀,但这必须保证是在菌体裂解之前进行.噬菌体侵染细菌的速度很快,在37度的条件下大约40分钟就可以产生100到300个子代噬菌体.从感染到释放前的这段时间叫潜伏期,大约经历20到30分钟.短时间的保温可获得足够数量的子代噬菌体,但又必须避免超出潜伏期(确保溶液分层),所以离心要在“短时间”保温后及时进行.

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