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DNA聚合酶的活性最适温度 DNA聚合酶1和DNA聚合酶III有什么区别

2021-04-27知识4

【dna聚合酶】DNA聚合酶1和DNA聚合酶III有什么区别这2种酶有什么区别,分别用在什么地方,求大神指导:大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(DNApolymeraseⅠ,DNAp?

DNA聚合酶的举例 大肠杆菌DNA聚合酶1、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(DNApolymeraseⅠ,DNApolⅠ)这是1956年由ArthurKornberg首先发现的DNA聚合酶,又称Kornber酶。此酶研究得清楚而且代表了其他DNA聚合酶的基本特点。⑴理化性质:纯化的DNApolⅠ由一条多肽链组成,约含1000个氨基酸残基,MW为109KD。分子含有一个二硫键和一个-SH基。通过二个酶分子上的-SH基与Hg2+结合产生二聚体,仍有活性。每个酶分子中含有一个Zn2+,在DNA聚合反应起着很重要的作用。每个大肠杆菌细胞中含有约400个分子,每个分子每分钟在37℃下能催化667个核苷酸掺入正在生长的DNA链。经过枯草杆菌蛋白酶处理后,酶分子分裂成两个片段,大片段分子量为76KD,通常称为Klenow片段,小片段的分子量为34KD。此酶的模板专一性和底物专一性均较差,它可以用人工合成的RNA作为模板,也可以用核苷酸为底物。在无模板和引物时还可以从头合成同聚物或异聚物。DNAPolⅠ在空间结构上近似球体,直径约65A。在酶的纵轴上有一个约20A的深沟(cleft),带有正电荷,这是该酶的活性中心位置,在此位置上至少有6个结合位点:[1]模板DNA结合位点;[2]DNA生长链或引物结合位点;[3]引物末端结合位点,用以专一引物或DNA生长链的3'-OH;[4]。

TaqDNA聚合酶的最适温度为74 为什么延伸温度为72 答案C 点拨:Taq DNA聚合酶是从热泉中一株嗜热细菌中提抄取到的,此酶具有以下特点:①耐高温,在95℃下反应2 h后其残百留活性是原来的40%;在70℃下反应2 h后其残留活性大于原来的90%.②在热变性时不会被钝化,不必每次在扩增后再加新酶.③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率,增加了扩增长度度.

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