pcr跑了一个循环后终止了，-20度保存，第二天再pcr，会对结果有影响吗
pcr仪使用时，在设定反应程序时，一共分了多少个步骤 1．常规程序将PCR反应所需的成分配置完后，在PCR仪上于94-96℃预加热几十秒至几分钟，使模板DNA充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于94℃保持30秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度（一般50-60℃之间），一般保持30秒钟，使引物与模板充分退火；在72℃保持1分钟（扩增1kb片段），使引物在模板上延伸，合成DNA，完成一个循环。重复这样的循环25～35次，使扩增的DNA片段大量累积。最后，在72℃保持3-7min，使产物延伸完整，4℃保存。2．复性（退火）和延伸温度复性的温度是PCR扩增是否顺利的关键因素，通常在50-60℃之间。具体的温度主要由引物的Tm值决定。延伸温度绝大多数设定为72℃。如果复性的温度很高，可以将延伸温度和复性温度设置成同一温度，变成二步法PCR。3．反应时间变性步骤一般使用30秒钟，如果模板的G+C含量较高，或直接用细胞做模板，变性时间可适当延长。复性时间有30秒种一般是足够的。延伸时间由扩增产物的大小决定，一般采用1kb用1分钟来保证充足的时间。4．循环次数循环次数主要与模板的起始数量有关，在模板拷贝数为104～105数量级时，循环数通常为25～35次。平台效应（plateaueffect）：PCR扩增过程后期会出现的产物的。
我在PCR扩增25个循环终止延伸之后，可以继续加10个循环吗，这个对条带有没有影响呢？ 理论上是可以的，2113我也遇到类似的情况，有一次5261PCR结果中间停电啦，不4102会几分钟后又来电了1653。我又向体系中加了一些酶，最后电泳，还是比价理想的PS，这还是关键看你的酶，可以向体系中加少许的酶，引物体系中酶最脆弱，而dntp，引物一般都是过量的。
