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核黄素荧光光度定量测定法 紫外可见分光光度法,用吸收系数法定量,公式是什么?

2021-04-26知识4

紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同 1、测量的范围不同:(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间,其中包括部分可见光。(2)可见分光光度计量程为320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。2、所用的灯不同:(1)紫外分光光度计通常用氢灯或氘灯。(2)可见分光光度计通常采用钨灯或卤钨灯。3、原理不同:(1)紫外分光光度计根据物质的吸收光谱研究物质的成分,是结构和物质间相互作用的有效手段。(2)可见分光光度计采用低杂散光,高分辨率的单光束单色器,保证了波长准确度、波长重复性和更高的分辨率。扩展资料紫外分光光度计的工作原理:物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同。因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。又因为许多物质在紫外-可见光区有特征吸收峰,所以可用紫外分光。

为什么分光光度法在目前环境监测中还是较常用的方法,它有何特点,发展方向是什么? 利用某些物质被紫外光照射后所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分

荧光分光光度法测定维生素B2含量 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:hsqwll文库实验九:2113荧光分光光度法测定维生素B2的含量一、5261实验目的41021、掌握标准曲线法定量分析1653维生素B2的基本原理。2、了解荧光分光光度计基本原理、结构及性能,掌握基本操作。二、实验原理维生素B2(又叫核黄素,VB2)是橘黄色无臭的针状结晶。其分子式为:C17H20N4O6,分子量:376.4。VB2分子中有三个芳香环,具有平面刚性结构,因此它能够发射荧光。VB2易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂,在中性或酸性溶液中稳定,光照易分解,对热稳定。VB2溶液在430~440nm蓝光的照射下,发出绿色荧光,荧光峰在535nm附近。VB2在pH=6~7的溶液中荧光强度最大,而且其荧光强度与VB2溶液浓度呈线性关系,因此可以用荧光光谱法测VB2的含量。VB2在碱性溶液中经光线照射会发生分解而转化为另一物质—光黄素,光黄素也是一个能发荧光的物质,其荧光比VB2的荧光强得多,故测VB2的荧光时溶液要控制在酸性范围内,且在避光条件下进行。实验九:荧光分光光度法测定维生素B2的含量在稀溶液中,当实验条件一定时,荧光强度F与荧光物质浓度c呈线性关系:F=Kc,这是荧光光谱法定量分析的依据。注意:高浓度时,荧光物质发生熄灭和自吸收。

#核黄素荧光光度定量测定法

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