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液相回收试验 高效液相色谱法测定中精密度与回收率怎么计算

2021-04-26知识8

我想用液相测样品中某物质的含量方法是文献上的但是样品不同,请问我用做回收试验吗? 最好是做一下。证明方法准确性。做回收率就不必做精密度了。还有就是我说的进样重复性,最好也做一下,可以用那个实验作为系统适用性实验。做这两个就足够了。

HPLC中的加样回收率试验怎么做呢?有几种方法 回收率包括绝对回收率和相对回收率.绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例.因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物,经过样品处理都有一定的损失.做为一个分析方法,绝对回收率一般要求大于50%才行.它是在空白基质中定量加入药物,经处理后与标准品的比值.标准品为流动相直接稀释而来,而不是同样品一样处理.若一样,只是不加基质来处理,可能会有很多影响因素被此屏蔽掉.如全部转移有机相时只转移了98%等.也就因此失去了绝对回收率的考察初衷.相对回收率严格来说有两种.一种是回收试验法,一种是加样回收试验法.前者是在空白基质中加入药品,标准曲线也是同此,这种测定用得较多,但有标准曲线重复测定的嫌疑.第二种是在已知浓度样品中加入药物,来和标准曲线比,标准曲线也是在基质中加药物.相对回收率主要考察准确度.准确度系指用该方法测定的结果与真实值或认可的参考值之间接近的程度.有时也称真实度.一定的准确度为定量测定的必要条件,因此涉及到定量测定的检测项目均需要验证准确度,如含量测定、杂质定量试验等.准确度应在规定的范围内建立,对于制剂一般以回收率试验来进行验证.试验设计需考虑在规定范围内,制备3个不同浓度的试样,各测定3次,即测定9次,报告。

关于液相色谱(HPLC)回收率, 回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1ppm,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度.意义就是回收率能反应该方法对我们测试的项目损失多少,当然回收率也有可能在100%以上空白加标回收:在没有被测物质的空白样品基质中加入定量的标准物质,按样品的处理步骤分析,得到的结果与理论值的比值即为空白加标回收率.样品加标回收:相同的样品取两分,其中一份加入定量的待测成分标准物质;两份同时按相同的分析步骤分析,加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果,其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标回收率.加标回收率的测定,是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.对于它的计算方法,文献中均给定了一个理论公式:加标回收率=(加标试样测定值-试样测定值)÷加标量×100%

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