高效液相色谱柱在作样前和作样后如何平衡 一般说的液相色谱柱多指的是反相色谱柱。反相色谱柱比如C18、C8、苯基柱等等。这些柱子保存在有机相中，比如甲醇、乙腈里面比较好，所以封存的时候大多用甲醇或者乙腈封存色谱柱。而反相的流动相大多数都是缓冲盐的溶液，这些无机盐溶液在纯有机相中容易析晶，所以中间会有一个10%的甲醇水（或乙腈水）作为缓冲。所以每次使用前：先用1.0ml/min的流速冲洗30min的10%甲醇水，然后上流动相平衡，大约30min基线跑平了就可以进样了。每次使用后：同样冲洗30min的10%甲醇水，把流动相里面的缓冲盐冲洗掉，然后用甲醇冲洗30min封存。其中的30min是大约10倍的色谱柱柱体积，针对的是比较常见的250mm*4.6mm内径的柱子，如果你用的是使用的是150mm或者100mm的短柱，可以根据柱长和柱内径计算柱体积。πr^2*柱长。如果色谱柱是正相，因为正相色谱的流动相里没有无机盐，所以就没有中间那个过渡了。可以直接冲洗流动相进行平衡了。使用结束之后直接用规定的正相溶液封存就可以了。
关于水的蒸汽压 根据拉乌尔定律：稀溶液溶剂的蒸汽压等于纯溶剂的蒸汽压乘以溶液中溶剂的摩尔分数.即Pa=Pa'*Xa，其中a代表溶剂.Pa即为纯溶剂的a的蒸汽压.当是纯水的时候，Xa=100%，其蒸汽压就是其饱和蒸汽压.这个饱和蒸汽压在一定的温度压力下是个定值，不是求出来是测出来的.补充：不同压力下饱和蒸汽压不相同.蒸汽压指的是在液体（或者固体）的表面存在着该物质的蒸汽，这些蒸汽对液体表面产生的压强就是该液体的蒸汽压.比如，水的表面就有水蒸汽压，当水的蒸汽压达到水面上的气体总压的时候，水就沸腾.我们通常看到水烧开，就是在100摄氏度时水的蒸汽压等于一个大气压.蒸汽压随温度变化而变化，温度越高，蒸汽压越大，当然还和液体种类有关.一定的温度下，与同种物质的液态(或固态)处于平衡状态的蒸汽所产生的压强叫饱和蒸汽压，它随温度升高而增加.如：放在杯子里的水，会因不断蒸发变得愈来愈少.如果把纯水放在一个密闭的容器里，并抽走上方的空气.当水不断蒸发时，水面上方汽相的压力，即水的蒸汽所具有的压力就不断增加.但是，当温度一定时，汽相压力最终将稳定在一个固定的数值上，这时的汽相压力称为水在该温度下的饱和蒸汽压力.当汽相压力的数值达到饱和蒸汽压力的数值时，液相的水分子仍然不断地气化，。
液相的柱压不稳定，总是上下波动且幅度很大，可以怎么解决？ 当液相柱压不稳定时可以进行以下操作：1、检查e69da5e887aa62616964757a686964616f31333431363534是否脱气，压力不稳定很可能是管路中有气泡。2、更换密封垫，泵密封垫损坏，会把空气带进泵内。3、打开泵的排气阀，按purge健排气，或者以大流速（2ml/m）排气，流动相真空脱气或者超声脱气。4、换下双泵，冲洗阀的过滤芯，将流动相混合均匀后，超声20min后，真接单泵分析就可。5、检查是否是柱子久用引起的柱压不稳，用异丙醇：甲醇＝10：90冲，流速要调低。扩展资料在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。1.样品是极性的且弱酸性的，就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。2.如果样品极性太强，或酸性太强，可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC（亲水色谱），也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。（缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验）。3.若样品是碱性的，可选择高纯硅胶柱（高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾）或一些。
