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Taq DNA聚合酶的特点 taq酶的聚合活性

2021-04-23知识9

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TaqDNA聚合酶的校对活性 该酶无校对活性,易产生错配碱基。TaqDNA聚合酶的种类a,保真性的一个通用标准是错配率,错配率越低保真性越好。普通 Taq 酶的错配率在 10-5 碱基/循环数,而高保真 Taq 酶错配率可降到 10-6 数量级,大大降低了出错的可能性;它适合对 PCR 保真性要求较高的实验,如基因筛选、测序、突变检测等等。高保真 Taq 酶的保真原理是:高保真 Taq 酶具有 3‘到 5’核酸外切酶的活性。市面上主要有两类产品:一类是混合型的高保真酶,将带有 Proofreading 活性的酶与普通 Taq 酶(用于提高扩增效率)混合起来;另一类是单一型的高保真酶。b,热启动Taq酶(高特异Taq酶):在 PCR 第一个循环变性之前,有一个升温的过程,引物和模板会有一些非特异性配对,如果这时 Taq 酶发挥活性,就很容易产生非特异性扩增,由于循环初期模板量非常少,产生的非特异性条带经过后面的指数扩增,就会严重干扰目的片段的扩增,甚至导致特异性条带不能扩出;而热启动 Taq 酶是必需经过高温才能激活的酶,因此在初始循环的变性之前它没有活性,不会产生非特异性扩增,这就大大提高了 PCR 扩增的特异性。c,高耐热Taq酶:对于有些模板变性温度较高,需要时间较长,可能要求高耐热性 Taq 酶,如 。

热稳定DNA聚合酶与DNA聚合酶有什么区别 最大的区别在2113于热稳定聚合酶5261耐高温,而dna聚合酶不耐高温,我们4102使用的BIOG Taq酶经1653过修饰,一般在95度加热5-10分钟活性中心才会暴露,才会产生聚合作用,这样就能有效避免低温下的模板错配,避免二聚体和非特异扩增。

#taq酶的聚合活性

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