正相色谱柱与反相色谱柱的区别 色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果，应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头，如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱，建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况，避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。3、使用PEEK 材料的通用接头，只需用手拧紧不需要特定扳手，使用压力为5000psi；使用温度不得超过100℃。流动相平衡：1、在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤，消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。。
死时间的色谱中的死时间 液相色谱死时间是指样品在整个色谱过程中完全不被保留、通过整个色谱系统所需要的时间。在色谱中测定死时间通常有两种方法，一是用所谓的无保留的探测物如尿嘧啶、某些无机盐等直接测定；二是根据同系物的保留时间用数学方法进行计算求取死时间。
求助，苯和萘在高效液相反相色谱出锋顺序 由流动相和固定相对被测物质的不同选择性而决定的。次要因素还有流速，柱温等。决定因素如下：1，物质本身性质2，固定相（色谱柱填料，长短，粒径）3，流动相（包括有机相水相配比，pH值，有机相组成，水相中缓冲盐组成，缓冲盐浓度，是否加入表面活性剂，是否加入离子对试剂等）4，流速（改变全部出峰时间，不会改变出峰顺序和相对保留时间）5，柱温6，色谱仪死体积（不同仪器有差异，同一仪器上测定死体积时间随流速而有轻微变化）
