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培养皿控制台 细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项

2020-07-26知识11

培养皿有何用途? 培养皿多用于微生物实验(如培养微生物),也可用于盛放少量其他实验材料。ndsl 密室逃脱攻略 1.移动到左下角,得到锥形红矿石和方块蓝矿石 TEZs/\\n2.管子脚下,得到细长黄矿石*-Xj 'Fi3.控制台下的管子,得到奇怪形状的钥匙 8i?z*+']4.移动到主控制台,把钥匙插进左下并拉下扳手,观察主控制台的横孔,得到操作卡片 P {TLd35.移动到中间的方洞,将要求的细长形矿石放进去,动作太慢会爆炸 ys%]9Ofx6.移动到电梯控制台把操作卡插进去,按下键 p&tfB@D7.移动到台阶左下得到空罐,在右边地面上得到空罐 gSz2,8.移动到手术台上,按黄色方键4次,查看台上的4和7 waY~ZrG.9.台脚下的地面,得到空罐 TFtuUbKy10.小台上面,查看台面,查看台上的3和9:#[:V711.移动到电梯控制台插卡,按上键,上楼后取卡-2dAWlc'612.主控制台,插卡,左边键盘操作后取卡,输入4379 x%m Y_?Pb13.主控制台,如果时间不多就放三角矿石,最多10分钟=u)}+\"5oz14.矿石收集台,插卡夹矿石,身上最多放4块 i}]>;]G15.电梯控制台,插卡,按下键,下楼后取卡 y:eLM16.配色控制台,插卡,左1空罐,右2矿石;R。uRiP`c以上可反复进行 重复N次后配成红蓝绿三色罐 小心爆炸时间?iI9|Xv17.电梯控制台,插卡,按上键,上楼后取卡 EVINL#。y18.主控制台,把扳手推上去让房间变暗][&19.培养。the 密室逃脱 NDS Stage7' 植入 培养皿左边培养皿的钥匙怎么拿出来 玩得太久,可能有点记不清了。copy你手上应该有很多“史莱姆”吧?控制台右边有一个裂开的管道,2113先后把红、黄史莱姆(貌似是这个顺序,不对的话请多试试别的)从裂缝扔进去,我记得这时史莱姆会顺5261着管道进入到培养皿里面,培养皿下面应该有个放东西的地方,好4102像是随便放入石头,就能拿到钥匙了。只能记住大致1653情节,特具体的实在想不起来了。抱歉~细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项 一、细胞复苏将冻2113存细胞从液氮5261中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进4102其融化。移人165315ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。二、细胞传代细胞密度达到80%~90%时.去培养基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。再加入10ml PBS(经高压灭菌,保存于40C),吹匀,吸取10微升进行计数,按照1×106/盘接种,在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。三、细胞冻存细胞密度达到80%~90%时,去培养基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。加入lml冻存液(90%血清,10%DMSO),放入冻存盒内(盒内有异丙醇,以保证温度降低的速度),立即放入一80℃冰箱内。设计一个细胞工程的实验室 1.植物细胞培养实验室设置1.基本实验室1.1 洗涤间 根据工作量的大小决定其大小,一般面积控制在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。地面应耐湿并排水良好。1.2培养基配制间 面积60平方米左右,配备的主要仪器设备有:冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。冰箱以体积180-200L为宜,用于储存培养基母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保存植物材料。天平应有不同感量。1.3消毒间 配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。如果没有条件的话,可以将上述工作间合并成一个准备间,要求是设备。关于微生物培养 1、配制培养基,配好之后灭菌。在这个过程中,配好的培养基一般是在锥形瓶中的,在锥形瓶中进行灭菌,灭完之后也是先放在锥形瓶中,等待分装,灭完菌之后放入无菌室或通风厨待用。2、培养皿灭菌(空的!培养皿的灭菌是在没有培养基的情况下进行的,不存在你所说的那种放置问题,一般是用专门灭培养皿的金属筒,或者用牛皮纸、报纸打包灭菌。3、灭完菌之后,培养皿放入无菌室或通风厨待用(不打开灭菌前的“包装”,从灭菌设备中拿出直接进无菌室或通风厨),在降至室温才使用。4、分装。一般在培养基温度降至50-60摄氏度的时候开始分装。若是提前准备好的,已经凝固在锥形瓶中的,用前先水浴加热熔化。在液态的情况下向培养皿中分装。5、待培养皿中的培养基凝固后(很快,分装完基本上就凝固个差不多了),此时才将培养皿倒置,防止皿盖上的冷凝水污染培养基(此时皿盖在下,培养基中蒸发出的水蒸气是向上走的,还是凝结于培养基上,就不会有在皿盖上形成水滴后再滴落的情况了,如此防止污染的)。6、接种培养。接种后,也是倒置培养(原因同 5 所说)倒置后还可以防止培养基水分蒸过快发,培养基变干,无机盐析出,营养成分浓度变大,不能使用,不利于微生物的生长。ndsl 密室逃脱攻略 1.调查墓碑后面,得到一个六羽石板\".X+~Uc2.将六羽石板安到墓碑左面墙壁的石板拼图中间,打开一扇暗门 {&$E3,3.移开墓碑右边的石头,得到一个四羽石板 4c0 N'=cB=4.在新打开的门右边的柱子下捡到一半的圣杯 1^VS@sL5.进入密室,首先取下台座上的宝石 m2g6.密室中的四个石像,只要转动枪兵和弓箭手即可,让骑士和步兵的盾牌分别挡住他们的攻击,密室左边的壁画会升起,在里面可以得到圣杯的另一部分和一块一羽石板^yh19_z>;n7.将密室右边台子上的宝剑取下,密室的门会关闭,不要着急,此时只要将圣杯和宝石依次放上去,密室的门就会打开 9uorr]m);8.回到一开始的房间,首先将之前放在壁画上的六羽石板取下,然后再将宝剑插到墓碑前面的槽里面,房间就会进水,此时如果长时间呆在水下的话主人公就会死亡,赶紧游上上层的房间先换口气吧 sjf q@9.再次潜入之前的房间,从墓碑对面屋顶的通气口处捡到一个三羽石板 oN#mrlq10.调查之前插在墓碑前面的宝剑,剑会折断,得到断剑/gE]miNhL11.再次进入密室,从屋顶上取下一块八羽的石板,回到上层的房间,用断剑打开石棺,发现一个缺了三块石板的石板图,将八羽石板放到中间,六羽石板放到左上,三羽石板放。谁有细胞传代培养具体的操作步骤和注意事项 悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用离心法后,加入新培养基后再吹打分散进行传代贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精,紫外照射30min。准备好培养瓶/皿,离心管,10%DMEM,0.25%胰酶,D-hanks液等,带上手套,口罩等,倒去旧培养基,用D-hanks液清洗一遍,去除沉积的死细胞等。加入2ml 0.25%胰蛋白酶消化液,消化2~3min,倒置显微镜下观察,待细胞单层收缩突起出现空隙时,倒去酶液。加入1~2滴管含有血清的培养液,反复吹打细胞,使其成细胞悬液。以1:2或1:3进行分装,补充新鲜培养基,并在培养瓶上做好标记,注明代号、日期,轻轻摇匀,37℃CO2培养箱培养。细胞培养24h后,即可观察培养液的颜色及细胞的生长情况。扩展资料:注意事项1、传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染。所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作。每一种细胞使用一套器材。培养用液应严格分开。2、每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代。3、如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BSS或培养基反复清洗,。

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