请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右，而目的基因ct值在25左右 有哪位高手能指点一下 看家基因的ct值是多少

做相对定量PCR 时，目的基因CT 值比内参基因CT 值低，是什么原因，别人 有多种原因。如果根据经验目的基因的表达确实应该低于内参基因的话，常见的问题是模板异常，如严重的DNA污染等。但也不排除其他原因，如引物特异性等。有两个内参基因时，目的基因的ct值怎么算 如何通过荧光定量目的基因和GAPDH计算相对表达量内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因，又叫看家基因，比如常用的GAPDH，actin。或者18s rRNA也可以。如果内参表达量一致，说明你PCR的上样量一致，样本的质量也一致。如果出入很大，说明你的样本的浓度或者是质量有问题。测到的目的基因的表达量就不可靠了管家基因是用来定量的。用来计算相对表达量。管家基因在相同量样品中的表达量我们认为是一致的。然后根据这个量来计算你的基因在不同样品中的表达量。所以每一个都需要单独的样品。基因组干扰需要你在提取RNA以后用DNase处理样品。如果不放心，可以拿处理过的RNA做膜版，跑一次，如果有带就是有污染，如果没有可以合成cDNA库了。请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右，而目的基因ct值在25左右 有哪位高手能指点一下 你选了个什么内参，表达量如此之低？感觉有点问题，检查一下融解曲线对不对。如果是正确的，说明你的目的基因表达量比内参高出一千倍啊。Ct值越大，表达量越低。做RT-PCR内参的作用是什么？应该如何选择管家基因 你说的应该是real time PCR吧，注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写，和real time一定要分开来。常说的qPCR，qRT-PCR，都是通过实时（real time）的方法，测定。请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右，而目的基因ct值在25左右 有哪位高手能指点一下 你选了个什么内参，表达量如此之低？感觉有点问题，检查一下融解曲线对不对。如果是正确的，说明你的目的基因表达量比内参高出一千倍啊。Ct值越大，表达量越低。。急问：用实施定量PCR测基因表达水平，是先提提总RNA吗？然后再分离出mRNA？对不对？另外，Ct值是直接得出 Ct值是通过PCR仪的分析软件直接得出 的，一般要做一个看家基因座内参看家基因是什么啊？（housekeepinggene）？ 你翻译错了，专业来说应该是持家基因或者管家基因。它是指所有细胞中均要表达的一类基因，其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。看家基因作用是什么？实时荧光定量PCR技术中为什么要用它？ 看家基因的意思是稳定表达的一种基因所以他的作用就是用来做内参比如在做PCR的时候，初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别，那么看家基因的作用就出现了，要在看家基因的表达水平相同的情况下，比较其他基因的表达是否有升高或降低。目的基因CT值大于35怎么进行相对定量计算 如何通过荧光定量目的基因和GAPDH计算相对表达量内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因，又叫看家基因，比如常用的GAPDH，actin。或者18s rRNA也可以。如果内参表达量一致，说明你PCR的上样量一致，样本的质量也一致。如果出入很大，说明你的样本的浓度或者是质量有问题。测到的目的基因的表达量就不可靠了管家基因是用来定量的。用来计算相对表达量。管家基因在相同量样品中的表达量我们认为是一致的。然后根据这个量来计算你的基因在不同样品中的表达量。所以每一个都需要单独的样品。基因组干扰需要你在提取RNA以后用DNase处理样品。如果不放心，可以拿处理过的RNA做膜版，跑一次，如果有带就是有污染，如果没有可以合成cDNA库了。