贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么？ MTT原理\\x09MTT全称为3-(4，5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3，5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝.是一种黄颜色的染料.\\x09MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法.其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能.二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量.在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比.该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等.它的特点是灵敏度高、经济.缺点：由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测.这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲的有机溶剂对实验者也有损害.MTT 溶液的配制方法 通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml.因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存即可.在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住.实验。
在MTT实验中要设置调零孔（培养基、MTT、二甲基亚砜）.而在加入MTT孵育4h之后需要将调零孔中的液体全部吸尽再加DMSO？还是不吸去调零孔中的液体直接加DMSO呢？ 处理孔吸弃，但是调零孔不吸弃？两个都不吸弃？你要明确下面两点再考虑怎么处理：（1）培养液中的血清对DMSO溶解甲臜结晶是有干扰的；（2）调零孔的作用是给所有处理孔一个空白底值；另外，实在不想吸弃的话，可以使用SDS-HCl-异丁醇三联溶解液.
如何计算细胞倍增时间 无法解答 ⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行mtt试验前，要进行预。
