紫外分光光度法狭缝影响 紫外-可见分光光度法的使用方法

紫外_可见分光光度法，用吸收系数法定量，公式是什么？ A=ECL C=A/ELA为吸收度；T为透2113光率；E为吸收系数，采用的表5261示方法是（E1％1cm），其物理4102意义为当溶液1653浓度为1%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸收度数值；C为100ml溶液中所含被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g；L为液层厚度，cm。紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。原理可见光、紫外线照射某些物质，主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收，而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择。紫外可见分光光度法中狭缝的位置 不知道你问的是什么问题？如果指仪器构造，有单色器的入口狭缝及出口狭缝，分别在单色器的入口处或出口处，具体安装位置千差万别。如果指分析测试时的参数选择，则要先根据分析方法中对分析波长的光谱带宽要求（或者对光谱分辨率的要求），对照仪器说明书中狭缝宽度与光谱带宽或光谱分辨率的数值选择。狭缝越窄光谱分辨率越高，带宽越窄，光强度越低，噪音相对较大。分辨率高检测的选择性好，但噪音可能增加，是一对矛盾，根据具体情况选择。看主要矛盾是什么决定取舍。紫外-可见分光光度法的使用方法 《中华人民共和国药典》2005年版 第一部 附录VA（P附录28）：（1）波长 由于环境因素对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm与576.96nm，或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正，钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰，也可作波长校正用，但因来源不同或随着时间的推移会有微小的差别，使用时应注意。（2）吸光度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，应符合表中的规定。波长/nm235（最小）257（最大）313（最小）350（最大）吸收系数的规定值 124.5 144.0 48.62 106.6 吸收系数的许可范围 123.0～126.0 142.8～146.2 47.0～50.3 105.5～108.5（3）杂散光的检查可按下页表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm。双波长分光光度法是在传统分光光度法的基础上发展起来的，它的理论基础是差吸光度和等吸收波长。在单位时间内有两条波长不同的单色光以一定的频率交替照射同一吸收池的溶液。紫外可见分光光度计使用中应注意哪些问题 【紫外可见分2113光光度计使用注意事项】在使5261用紫外可见分光光度计时，必4102须要注意一些使用后的1653维护、保养，和一些基本使用注意事项，才能达到更好的使用效果。1、使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。2、取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防 尘保存。3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。4、测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用25px石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。5、供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低。急求紫外分光光度法的详细操作步骤 一、原理 可见光、紫外线照射某些物质，主要是由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收，而产生化合物的可见紫外吸收光谱。基于物质对光的选择性吸收的特性而建立分光。紫外可见分光光度法的定性，定量分析的依据是什么 其依据为当2113光穿过被测物质溶液时，物5261质对光的吸收程度随光的波长不同而变4102化。1653紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。光谱法（spectrometry）是基于物质与电磁辐射作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法；或分为原子光谱法和分子光谱法；或分为能级谱，电子、振动、转动光谱，电子自旋及核自旋谱等。分光光度法是光谱法的重要组成部分，是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。扩展资料：对溶剂要求：含有杂原子的有机溶剂，通常均具有很强的末端吸收。因此，当作溶剂使用时，它们的使用范围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外，当溶剂不纯时，也可能增加干扰吸收。因此，在测定供试品前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即将溶剂置1cm。紫外分光光度计改变狭缝对实验结果有何影响 狭缝过宽，单色光不纯，测出的吸光度改变，准确度下降。狭缝过窄，通光量小，灵敏度下降。一般廉价仪器多为固定宽度的狭缝，不能调节。精密仪器狭缝宽度可调节差示紫外分光光度法？ 分光光度法中，样品中被测组分浓度过大或浓度过小(吸光度过高或过低)时，测量误差均较大。为克服这种缺点而改用浓度比样品稍低或稍高的标准溶液代替空白试剂来调节仪器的100%透光率（对浓溶液）或0%透光率（对稀溶液）以提高分光光度法精密度、准确度和灵敏度的方法，称为差示分光光度法。差示分光光度法又可分高吸光度差示法，低吸光度差示法，精密差示分光光度法等。示差法和一般的光度法不同之处在于，示差法不是以空白溶液（不含待测组分的溶液）作为参比溶液，而是采用比待测溶液浓度稍低的标准溶液作为参比溶液，然后测量待测溶液的吸光度，从而测出待测液的浓度，从而大大提高测定结果的准确度。A=A1-A2(Ax+Az)-(Ay+Az)Ax-Ay(Ex-Ey)CL

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