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pcr跑40个循环大概多久 大家的PCR一般都跑多少个循环啊

2021-04-04知识4

大家的PCR一般都跑多少个循环啊 我觉得国外杂志上说要跑50个循环是有可能的。但我们一般也就25-35个循环,我们实验室有人跑过40个循环的,但是那种是所谓touch down 的方法。具体要跑多少个循环,我认为有以下几个因素可以决定:最关键的是引物设计的优劣,这几乎直接决定了实验的结果;其次是要扩增的PCR产物的长度和GC含量了,长度越长,当然圈数要相应增加了,GC含量高些,相应就难扩一点;还有就是TAQ酶量和引物浓度了,浓度大些,相应的圈数可能就要少些,但我试过,浓度过大会抑制反应;此外我觉得模板的种类和质量还有一定关系,不同物种因为GC含量有所区别所以扩增效率也会有所差别。最后,我最喜欢用PE9600了,我几乎从未在它上面失过手,比PRE9700还好用,真不愧为\"PCR至尊

PCR循环次数能超过40次吗 可以的,一些模板浓度极低的样品,或者大片段扩增,为了获得足够的产物,有时候会超过40个循环。也有一些特殊的PCR,如染色体步移中的扩增,要扩增超过40个循环。

为什么我的PCR产物有一半能跑出来啊还有一半什么都没有?做了2次都这样.我跑了十个样本,结果只有五个有条带(跟我需要的一样),另外五个什么都没有。我没说一定都能扩出来了,我只是想知道造成这个的原因有哪些,DNA的浓度我测过,浓度差别不大。

#pcr跑40个循环大概多久

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