transwell实验原理与步骤 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:jie233051一、Transwell小室制备1.无基质胶Transwell小室制备①包被基底膜:用50mg/LMatrigel1:8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面,4℃风干。如果需要在下室面铺FN的话,可将200ul枪头的尖端剪掉,吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原(collagen)的话,一般配成0.5mg/ml,直接用枪吸了涂在膜上。②水化基底膜:吸出培养板中残余液体,每孔加入50ul含10g/LBSA的无血清培养液,37℃,30min。另有tianjin_glioma战友提供的方法:在上室的聚碳酸酯膜上加入稀释后的Matrigel(3.9ug/ul)60-80μl(注意体积不可太大,以刚把聚碳酸酯膜浸湿为最好),置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。2.有基质胶的Transwell小室制备 Chemicon公司e69da5e887aa3231313335323631343130323136353331333433623765的ECM550系列说明书要求,将小室放入培养板中,在上室加入300μl预温的无血清培养基,室温下静置15-30min,使基质胶再水化。再吸去剩余培养液。二、制备细胞悬液①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12-24h,进一步去除血清的影响。但这一步并不是必须的。②消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用PBS洗1-2遍,用含BSA的无血清培养。
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血凝试验的操作步骤及方法 方法举例为:如病毒HA效价为8log2,其4个血凝单位为6log2,则病毒稀释64倍即可。根据样品数确定所需抗原量做稀释 工具/原料 微量移液器、96孔微型血凝反应板、微量振荡器、。