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如何测定纤维素酶的活性高中 请问要是纤维素酶失去活性的具体方法有哪些?

2021-03-25知识8

用DNS法测纤维素酶活性,为什么分光光度计示数总是会跳,不能稳定下来? “做出来的结果R值还好,但是整个曲线偏离原点很多,导致我的样品测出来对应的值都变负了。这可能是空白对照除了问题。“分光光度计示数总是会跳”可能是因为溶液不够均匀导致的。比如纤维素过滤得不够完全。

请问要是纤维素酶失去活性的具体方法有哪些?

纤维素酶活性 纤维素酶是水解纤维素生产葡萄糖及纤维二糖的一类酶的总称。包括C1酶、CX酶及纤维二糖酶。C1酶使天然纤维素晶体分链,成为直链纤维素。CX酶不能水解天然纤维素,但能分解直链纤维素β-1,4糖苷键生成纤维二糖。纤维二糖经过纤维二糖酶作用生成葡萄糖。以羧甲基纤维素钠盐(简称CMC)作为纤维素酶作用的底物。但需要指出的是CMC无论在结构上还是在性质上都不同于天然纤维素,天然纤维素不溶于水,而CMC有很强的亲水性,非常容易被纤维素酶分解。在相同条件下,同一种纤维素酶分解CMC所产生的还原糖远大于水解天然纤维素所产生的还原糖。操作方法pH值为4.6的柠檬酸缓冲浓浓度为0.1mol/l的柠檬酸溶液26.7ml和浓度为0.2mol/l的磷酸氢二钠溶液23.3ml,混合后加水稀释到1000ml。pH值为5.0的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液取浓度为0.2mol/l的磷酸氢二纳溶液25.7ml和浓度为0.1mol/l柠檬酸溶液24.3m1,混合后加水稀释至 1000ml。羧甲基纤维素钠盐溶液称取CMC 1g,加水1000ml,在水浴中加热溶解,再加入20mlpH值为5.0的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液和 40ml水,混匀。样品酶活的测定取纤维素酶粉5g,充分碾细,加100ml蒸馏水,与40℃水浴中,搅拌3Omin,使酶蛋白充分溶出,过滤,离心取上。

最近做实验,碰到一些问题纤维素酶活性1:1000是什么意思?如何用纤维素酶?使用条件什么的如何使用活性1:1000的纤维素酶,并不是如何配置缓冲溶液和测试活性,还有详尽一些的回答么?谢了

求:瓜果半纤维素含量测定的方法 瓜果类半纤维素酶活性的测量方法 详细点,有步骤

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您好.请问有测定植物纤维素酶活性的方法吗.生意经求助

纤维素酶活的活性检测方法及使用说明是什么 这些是在索莱宝官网上借鉴的:(仅供参考)纤维素酶活的活性检测方法1.纤维素CMC酶1.0标题用3.5一二硝基水杨酸法测定纤维素CMC酶活性单位。2.0范围生产分析和质量控制部门适用。3.0原理纤维素CMC酶(EC3.2.1.4)水解羧基纤维素分子中β-1.4葡萄糖苷键,释放出的还原糖(以葡萄糖计)与3.5二硝基水杨酸(DNS)反应,产生颜色变化,这种颜色变化与释放还原糖(以葡萄糖计)的量成正比关系,即与酶样品中的酶活性成正比。通过在550nm的光吸收值查对标准曲线(以葡萄糖为标准物)可以确定还原糖产生的量,从而确定出酶的活力单位。4.0试剂4.1无水醋酸钠(分析纯)4.2冰醋酸(分析纯)4.3 3.5-二硝基水杨酸 4.4无水葡萄糖4.5四水酒石酸钾钠(分析纯)4.6氢氧化钠(分析纯)4.7重蒸苯酚(分析纯)4.8无水亚硫酸钠(分析纯)4.9叠氮化钠(分析纯)4.10羧甲基纤维素钠 5.0仪器5.1水浴锅(恒温)50±1℃ 5.2电热干燥箱80±1℃ 5.3 722型分光光度机计 5.4分析天平感量0.1㎎ 5.5一级玻璃制品 5.6电冰箱 6.0试剂的准备6.1乙酸-乙酸钠缓冲溶液(PH=4.8)溶液A:量取冰醋酸6ml,定容至1000ml,制成0.1M醋酸钠溶液。溶液B:称取8.2g醋酸钠,溶解后容至1000ml,制成0.1M醋酸钠溶液。以A:B=4:6的。

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