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RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样, pcr无目标产物

2021-03-23知识8

PCR产物测序怎么不是我的目的片段 测序测2113错了,用的不是你的模板;你送的样本和5261你想要的目的基因序列是4102不一致的。你可以把测序1653得到的目的序列 blast一下,如果是载体序列而且和你所用的时候一致的,基本是你自己的问题。如果是非你常用载体序列,或者是其他模式生物的基因序列,那就是测序公司弄错了。你重新制备样品让他们重新测序

RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样, pcr无目标产物

pcr 产物测序后双峰,我该怎么办 可能有三种原因抄:2113一,pcr产物不纯,电5261泳条带单一并不一定就说明4102没有非特异性扩增1653,也可能非特异性扩增产物与目标产物size相近,或浓度很低。解决办法是提高退火温度做pcr,或直接换pcr引物,再或者可以补订专门的测序引物做测序反应,提高测序反应特异性。二,pcr产物纯化做的有问题。可补做纯化看看。三,测序引物有污染。可补送引物测序。如果做的是克隆测序,还有可能是纯在双克隆。

pcr产物跑胶条带不清楚,有一点扩开。是primer有问题吗,还是模板量不够。 楼上说的很好了 我补充一下:1)cDNA中GC含量,一般GC含量过高的cDNA很难PCR 如果不行你可以加入某些添加剂,例如DMSO或者甜菜碱 2)另外巢式PCR应该也很适合解决你的问题 。

如何提高pcr目标产物 首先要根据反应体系适当增加循环次数,其次如有必要可以用第一次的反应产物做模板进行第二轮扩增。

PCR产物比目的条带大??????

PCR产物要看一下是不是目的片段,需要将扩增出来的整个片段测序吗?具体应该怎样做? 最好把pcr产物测通,这样最准确.具体的很简单,直接把pcr产物给测序公司,就可以了.要求是条带要单一,含量要足够.可以咨询相关的测序公司.

超弱智的问题,PCR扩增产物长度是指目的基因的扩增长度还是指什么?为什么目的基因有700多,扩增产物长度 PCR是扩增数目的。目的基因有700多,扩增产物长度只有200.这个就是引物选择的问题了。引物决定了扩增的起始位置,如果你选择的引物正好是500以后的位置,那么扩增产物长度就只有200了。

#pcr无目标产物

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