紫外可见分光光度法测量时为什么要将吸光度控制在一定范围之内 紫外分光光度法测铁标液

实验报告-紫外-可见分光光度法测铁的含量- 最低0.27元开通文库会员，查看完整内容>；原发布者：姬态尼Fe3+能与领二氮菲生成淡蓝色配合物（不稳定），故显色前加入还原剂：盐酸羟胺使其还原为Fe2+。三、仪器及试剂紫外可见分光光度计、铁标准溶液：含铁0.01mg/mL、0.1%邻菲罗啉水溶液、10%盐酸羟胺水溶液、1mol/lNaAc缓冲溶液（pH4.6）。四、实验步骤1．吸收曲线的绘制和测量波长的选择吸取0.0mL和6.0mL铁标准溶液分别注入两个50mL容量瓶中，依次加入5mlNaAc溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm之间，每隔0.5nm测吸光度。然后以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。2、标准曲线的绘制 分别吸取铁的标准溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于6只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸－醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在其最大吸收波长下，用1cm比色皿，以试剂溶液为空白，测定各溶液的吸光度，以铁含量(mg/50ml)为横坐标，溶液相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。五、实紫外可见分光光度法特点和适用范围 一、紫外可见分光光度法的2113特点52611、与其它光谱分析方法相比，紫外可见4102分光光度法事物仪1653器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快。2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。3、紫外可见分光光度法的选择性好。4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。二、紫外可见分光光度法的适用范围紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面，在许多领域更是必备的分析方法，例如食品等行业中的产品质量控制。扩展资料紫外可见分光光度法的注意点：1、准备操作仪器前，需要先查看一下指针仪器在断电的情况下，表面指针是否指向零刻度。如若不是，理应先调零然后才能连接电源。2、在使用的过程中，操作员应该尽量避免对镜灯的触碰，放大器使用过后，一定需要把档位归置到零。3、在操作紫外可见分光光度计时，操作人员需要留意一下机器的干燥剂。4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。参考资料来源：-紫外-可见分光光度法紫外可见分光光度法测量时为什么要将吸光度控制在一定范围之内 是因为：吸光度A值的测定读数在0.2~0.8 的范围内，可以有最小的光度误差。分光光度法和紫外分光光度法有何区别？ 分光光度2113法是通过测定被测物质在特定波长处或5261一定波长范围内的4102光吸收度，对该物质进行1653定性和定量分析的方法。1.基本原理 单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，即朗伯-比尔定律，这是吸收光谱法定量的理论依据，其关系式如式 3-1：A=ECL 式(3-1)式中A 为吸收度；E 为吸收系数，即单位浓度、单位液层厚度的吸收度数值；C 为溶液浓度；L 为液层厚度。紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200~760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立的光谱分析方法。《中国药典》(2005 年版)有 10 种药材用该法进行药材的有效性评价。其主要特点为：灵敏度高，可达 10-4 g/ml~10-7 g/ml；准确度高，相对误差为 2％~5％。中药中有紫外吸收的成分或本身有颜色的成分，在一定的浓度范围内，其溶液的吸收度与浓度符合朗伯-比尔定律，均可用此法进行分析。本法适于大类成分的含量测定，如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。2.定量测定法 测定时，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用 1cm 的石英吸收池，在选（规）定的吸收峰波长±2nm 以内测试几个点的吸光度，或由仪器在选定波长附近自动扫描测定，。分光光度法分2113光光度法是通过测定被测物质5261在特定波长处或一定波长范4102围内光的吸收度，对该物1653质进行定性和定量分析的方法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与众不同波长相对应的吸收强度。如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法，也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法，称为紫外分光光度法；用可见光光源测定有色物质的方法，称为可见光光度法。它们与比色法一样，都以Beer-Lambert定律为基础。上述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区，可见光区，红外光区。波长范围(1)200～400nm的紫外光区，(2)400～760nm的可见光区，(3)2.5～25μm(按波数计为4000cm～400cm)的红外光区。仪器紫外分光光度计，可见分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。编辑本段基本原理当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后，由于一部分光被体系吸收，。原子吸收分光光度法和紫外可见分光光度法有何异同？ 一、相同之处：21131、它们均是依据样品对入射光的吸5261收来进行测量的4102。即经处理后的样品1653，吸收来自光源发射的某一特征谱线，经过分离后，将剩余的特征谱线进行光电转换，经过记录器记录吸收强度的大小来测定物质含量。2、这两种方法都遵守朗伯比尔定律。3、就组成设备而言，这两种方法均由光源、单色器、吸收池（或原子化器）、检测器这四大部分组成。二、不同之处：1、吸收机理不同原子吸收观察的是构成物质的元素（原子）中的电子在原子轨道中的跃迁，属于原子吸收；紫外可见光吸收观察的是构成物质的分子中的电子在分子轨道中的跃迁，属于分子吸收。2、单色器与吸收器的位置不同在原子吸收光谱仪中，原子化器的使用相当于吸收池，它的位置在单色器之前，而分光光度计中吸收池在单色器之后。3、所需光源不同原子吸收光谱是窄宽带原子吸收光谱，因而它所使用的光源必须是锐线光源（空心极灯等），在测量是，必须将样品原子化，转化成基态原子。紫外可见分光光度法是利用有色化合物对光的吸收来测定的，属于宽带分子吸收光谱，它可以使用连续光源（钨灯、氢灯等）。参考资料来源：—原子吸收分光光度法参考资料来源：—紫外-可见分。

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