扩增曲线不光滑实时荧光定量PCR中华扩增曲线为什么不平滑？

2021-03-20知识5

做PCR时Ct值较小，扩增曲线跑不上去是为什么？ Ct值小说明模板的起始浓度大，可以适当降低模板浓度.曲线跑不上去原因有很多，可能是引物的问题也有可能是酶的原因，还是得看具体情况.

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什么是荧光扩增曲线，一般来说可以分成几个阶段？一般在荧光定量PCR中会用到扩增曲线。描述PCR动态进程的曲线即为扩增曲线，在进行PCR反应过程中，通过检测系统对PCR管内的样品进行实时检测，最后将荧光信号值通过成像技术显现在电脑上。正常的扩增曲线包括四个阶段：基线期，指数增长期，线性增长期，平台期。

定量pcr没有扩增曲线是什么原因？一般扩增曲线是应该有的，如果没有：1、扩展失败，应调整反应条件和体系。建议：把你做的qPCR板不要丢了，拿去做一个普通凝胶电泳，看看有。

求助高手，为什么有溶解曲线却没有扩增曲线实时PCR产物的Tm值大小一般会在80deg；上下，所以溶解曲线不必从40deg；开始，可以从65deg；开始进行溶解曲线绘制，另外在产物之前出现的小峰，同时也在阴性对照中出现了，。

PCR常见的曲线异常去文库，查看完整内容>；内容来自用户：残鹰的等待2018/9/10QPCRFAQ（四）-常见的曲线异常_搜狐科技_搜狐网QPCRFAQ（四）-常见的曲线异常2017-09-0816：02诺唯32313133353236313431303231363533e59b9ee7ad9431333433646366赞原标题：QPCRFAQ（四）-常见的曲线异常小V是真心地希望并祝福科研宝宝们实验都顺顺利利~可科研做多了，总会遇到各种奇葩结果，比如下面这些情况…不用担心，小V帮你找原因。1、扩增曲线形状异常a、扩增曲线不光滑：信号太弱，经系统矫正后产生。提高模板浓度重复实验。扩增曲线断裂或下滑：模板浓度较高，基线的终点值大于Ct值。减小基线终点(Ct值-4)，重新分析数据。https：//www.sohu.com/a/190404653_2168351/72018/9/10QPCRFAQ（四）-常见的曲线异常_搜狐科技_搜狐网图1基线设置不当扩增曲线c、个别扩增曲线突然骤降：反应管内留有气泡，由于温度升高后气泡破裂，使仪器检测到的荧光值突然降低所致。进行扩增反应之前要仔细检查反应管内是否有气泡残留。d、扩增曲线呈锯齿状且不连续：ROX添加不当，需校正参比染料。https：//www.sohu.com/a/190404653_2168352/72018/9/10QPCRFAQ（四）-常见的曲线异常_搜狐科技_搜狐网2、反应结束。