紫外分光光度法药典标准 紫外分光光度法

求紫外分光光度计的校正步骤 校正吸光度常用一很纯物质 一定浓度的溶液为标准，且此溶液的吸光度系数经不同实验室核对，为了使标准液吸光度不受测定波长的微移动而有改变，常选择具有较平滑吸收高峰的物质。同时要求溶液稳定，且在相当的波长范围内吸收度的改变符合Beer-Lambert定律，常用硫酸铜、硫酸铵钻和硝酸钠或钾的溶液。铬酸钾溶液是最常用的标准溶液，此溶液在紫外区和可见区均适用。校正波长或波数可用具有窄吸收带的溶液，滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。如果要求很高的精密度时，可用放电灯泡发射的射线来校正。有的光谱仪其上已装有一个为校正用的灯。苯的蒸气对校正一定范围的波长亦很有用，可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中，测其吸收波长，在远紫外区可用氧气的吸收带进行校正。用各种稀土金属的滤光片，可以很快地校正波长，但准确度不如上述方法高。常用含有钬和钕、镨离子的滤光片。扩展资料：日常维护一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降；造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。。分光光度法分2113光光度法是通过测定被测物质5261在特定波长处或一定波长范4102围内光的吸收度，对该物1653质进行定性和定量分析的方法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与众不同波长相对应的吸收强度。如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法，也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法，称为紫外分光光度法；用可见光光源测定有色物质的方法，称为可见光光度法。它们与比色法一样，都以Beer-Lambert定律为基础。上述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区，可见光区，红外光区。波长范围(1)200～400nm的紫外光区，(2)400～760nm的可见光区，(3)2.5～25μm(按波数计为4000cm～400cm)的红外光区。仪器紫外分光光度计，可见分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。编辑本段基本原理当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后，由于一部分光被体系吸收，。紫外可见分光光度计能测哪些指标 每种物质就有2113其特有的、固定的吸收光谱曲线，可5261根据4102吸收光谱上的某些特征波长处的吸1653光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。因此可以适用这个原理、并在紫外可见光分光光度计光谱检测范围的物质都可以使用紫外可见光分光光度计。常见的有以下几种：药物分析：《国家药典》可用紫外可见光分光光度法检测的药品，适用于药品检验、药物分析、制药等行业。生命科学：DNA、蛋白质的浓度。农牧渔：农药残留检测、作物成分检测、兽药检测、饲料检测、化肥检测、土壤成分检测、水产养殖检测等。地质勘探：矿石中金属元素和无机盐的测定。食品安全：添加剂、防腐剂、香料、脂肪、酶、糖类、香料、矿物质、维生素等的含量。环境监测：水质、大气、降雨及土壤等的监测，测定其中各类污染物的含量。紫外分光光度法 取市售左旋多巴片剂10片(左旋多巴标示含量为250mg/片)，准确称量后研细混匀，再准确称取粉末一定量(约含左旋多巴50mg)，加0.2mol/L硫酸5mL溶解，用水定容至100mL。干过滤，。紫外分光光度法测溶液浓度？ 1、280nm的光吸收法用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度为1.0 mg/mL。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。2、280 nm和260 nm的吸收差法核酸对紫外光有很强的吸收，在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克)，但核酸在260 nm处的吸收更强，其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍；而蛋白质则相反，其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。3、215 nm与225 nm的吸收差法蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时，可用215nm与225 nm吸收值之差，通过标准曲线法来测定蛋白质稀溶液的浓度。4、肽键测定法蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱，与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50～500 mg/mL已知浓度的5.0 mL蛋白质溶液，测定238 nm的光吸收值A238，以A238为纵坐标，蛋白质含量为横坐标，绘制出标准曲线。未知样品的浓度即可由标准曲线求得。扩展资料：紫外分光光度法原理光谱法（spectrometry）是基于物质与电磁辐射作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。光谱法可分为发射光谱法、吸收光谱法、散射光谱法；或分为原子光谱法和。《中国药典》规定紫外分光光度法测定中，溶液的吸收度应在多少之间时误差最小？（) A．0.00～2.00 B．0.3～1.0 E紫外分光光度法 在实际测量中，采用在另2113一等同的吸收5261池中放入溶剂与被分4102析溶液的透射强度进行比1653较，即：A=lg(I溶剂/I溶液)≈lg(I 0/I)吸光度具有加和性：A总λ=A1λ+A2λ+…Anλ比尔定律应用的局限性：只适用于稀溶液、化学偏离、仪器偏离Page 84.2 紫外一可见分光光度计Page 91.光源功能：提供能量激发被测物质分子，使之产生电子光谱谱带（提供宽带辐射）。连续光源：广泛应用在吸收和荧光光谱中(气体放电光源)氘灯、氢灯紫外可见氩灯真空紫外氙灯真空紫外、紫外、可见(热辐射光源)钨丝灯、卤钨灯可见光区Page 102.单色器功能：从光源辐射的复合光中分出单色光。3.吸收池功能：盛放分析试样（一般是液体）Page 114.检测器功能：检测光信号，测量单色光透过溶液后光强度变化的一种装置。5.信号显示系统Page 126.紫外一可见分光光度计的类型(1)单波长单光束分光光度计缺点：测量结果受电源波动的影响较大，误差较大。Page 13(2)单波长双光束分光光度计优点：除了能自动扫描吸收光谱外，还可自动消除电源电压波动的影响，减小放大器增益的漂移。Page 14(3)双波长分光光度计优点：在有背景干扰或共存组分的吸收干扰的情况下，可以对某组分进行定量测定。。

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