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folin法测定碱性蛋白酶活性 生化实验报告 胰蛋白酶活力测定

2021-03-11知识8

如何使用Folin-酚法测定蛋白酶的活力?

胰蛋白酶比活力的测定 1.胰蛋白酶是一种水解酶,它将酪蛋白水解成酪氨 酸等物质。2.所生成的酪氨酸能与酚试剂反应成蓝色物质.酚 试剂又名Folin试剂,是磷钨酸和磷钼酸的混合物,它在碱性条件下。

测定蛋白酶活力实验 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:临泽潇洒哥测定蛋白酶活力实2113验一、实验5261目的1.加深了解酶活力的概念。41022.学习掌握测定蛋白酶活1653力的方法。二、实验原理酶活力指酶催化某一特定反应的能力。其大小可用在一定条件下酶催化反应进行一定时间后,反应体系中底物的减少量或产物的生成量来表示。酶活力单位是表示酶活力大小的重要指标。本实验规定酶活力单位(U)为一定条件下每分钟分解1μg酪氨酸所需的酶量。实验选用枯草杆菌蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的反应体系。产物酪氨酸在碱性条件下与Folin-酚试剂反应生成蓝色化合物,该蓝色化合物在680nm处有最大光吸收,其吸光值与酪氨酸含量呈正比。因此通过测定一定条件下产物酪氨酸的含量变化,可计算出蛋白酶的活力。三、仪器和试剂仪器:恒温水浴锅、分光光度计、试管及试管架、干燥滤纸、玻璃漏斗。原料枯草杆菌蛋白酶:称取1g枯草杆菌蛋白酶粉,用少量0.02mol/L,pH7.5磷酸缓冲液溶解并定容至100mL,震荡15分钟,使充分溶解,干纱布过滤,取滤液冰箱备用。使用时视酶活力高低用缓冲液适当稀释。试剂1.Folin-酚试剂:在2L磨口回流瓶中加入钨酸钠(Na2WoO4.2H2O)100g,钼酸钠(Na2WoO4.2H2O)25g,蒸馏水。

Folin-酚法测蛋白质的原理和操作 Folin-酚法蛋白定量包括两步反应:第一步生成蛋白质一铜络合物;

实验《胰蛋白酶活力的测定》思考题 急急急急急。。。会的帮忙!!谢谢~~

胰蛋白酶测活力去正规医院就行,能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,…

菠萝蛋白酶提取,纯化与活性鉴定过程中所用缓冲液ph值不同,为什么

生化实验报告 胰蛋白酶活力测定 去文库,查看完整内容>;内容来自用户:huang900722胰蛋白酶活力测定一、实验原理1、福林—酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸,在碱性条件下极不稳定,易62616964757a686964616fe4b893e5b19e31333433646366被酚类化合物还原为蓝色化合物(钨蓝和钼蓝)。2、蛋白质中含具酚基的氨基酸(酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸),用胰蛋白酶水解蛋白底物,生成含酚基的氨基酸与福林—酚试剂反应,生成蓝色化合物,在一定的范围内,蓝色化合物颜色的深浅与酶活力的大小成正比。二、实验仪器1、试管2、7220分光光度计3、恒温水浴锅三、实验试剂1、福林试剂B:见福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质的浓度部分(冰箱中)2、0.55mol/L碳酸钠溶液:58.3g无水碳酸钠溶于蒸馏水,稀释并定容至1000ml3、10%三氯乙酸溶液4、0.2mol/L磷酸缓冲液(pH7.5):5、0.5%酪素溶液:称取0.5g酪素,以0.5mol/L氢氧化钠1ml湿润,再加少量0.2mol/L磷酸缓冲液稀释。在水浴中煮沸溶解,冷却,稀释并容至100ml,冷藏在(冰箱)里。6、500ug/L酪氨酸溶液7、胰蛋白酶溶液(冰箱中)四、实验步骤1、标准曲线的制作:按下表加入试剂:管号|1|2|3|4|5|6|500ug/酪氨酸溶液/ml|00.2|0.4|0.6|0.8|1.0|蒸馏水/ml|。

folin-酚法测定蛋白酶活力

folin-酚法测定蛋白酶活力 我认为是,福林酚试剂的显色反应,就是由酪氨酸、还有色氨酸、半胱氨酸引起的;测定酶的水解活性,当酪氨酸含量越多,即颜色越深,说明蛋白质被水解程度越高,所以蛋白酶水解活性越强的~

#folin法测定碱性蛋白酶活性

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