蛋白质等生物大分子的分离提取应选用哪种离子交换剂？为什么 离子交换柱提取核酸

核酸提取的主要步骤及方法，核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，是生命最基本的物质之一。核酸存在于所有动物细胞、植物细胞、微生物内、生物体内的核酸常与。什么是液-固色谱法？ 根据分离机理的不同，高效液相色谱可分为液-固吸附色谱、液-液分配色谱（正、反相）、离子交换色谱、离子对色谱和分子排阻色谱。1.液固色谱使用固体吸附剂，色谱柱上分离组分的原理是根据固定相对组分的不同吸附力进行分离 分离过程是吸附-解吸平衡过程。常用的吸附剂是粒径为5-10μ m的硅胶或氧化铝 适用于分子量为200~1000的组分分离，其中大部分用于非离子化合物。离子化合物容易拖尾 它通常用于分离异构体。2.液-液相色谱使用固定相，该固定相通过在载体表面涂覆特定的液体物质或化学结合到载体表面而形成分离原理是根据分离出的组分在流动相和固定相中的不同溶解度进行分离分离过程是一个分配平衡过程。涂层固定化具有相应的良好惯性；流动相必须预先用固定相饱和，以减少固定相从载体表面的损失。不同批次的温度变化和流动相差异通常会导致色谱柱发生变化。此外，流动相中存在的固定相也使样品的分离和收集变得复杂。因为涂覆的固定相对于避免静止液体的损失是困难的，所以现在很少使用它目前主要采用化学键合固定相，如c18、c8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。液相色谱法可根据固定相和流动相的极性分为正相色谱法（NPC）和反相高效液相色谱法。正相色谱极性固定相（如。四大色谱原理是什么？ 色谱法分类 按两相的物理状态可分为：气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC)，。软膏与凝胶得区别 软膏 ruǎngāo(1)[ointment]∶用于皮肤的含脂类或油脂类物质(如凡士林、猪油、羊毛脂)为基质的半固体药物制剂(2)[unguent]∶润滑剂或药膏(如用于痛处或烧伤)gel ning jiao。简述核酸分离的基本 原理？ 核酸分离与纯化的原则核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开。在分离核酸时应遵循以下原则：保证。如何除去溶液中的蛋白质 （一）水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂，通常用量是原材料体积的1-5倍，提取时需要均匀的搅拌，以利于蛋白质的。质粒DNA纯化的试验原理：溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合，进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加，作为补偿，将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后，超螺旋度大为增加，从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限，可继续结合更多溴化乙锭，直至达到饱和(每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子)。由于染料的结合量有所差别，线状和闭环DNA分子在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来，氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时，为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁，但其中最好的方法，也应是聚乙二醇分级沉淀法。从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多，其分离的依据可利用分子大小不同，碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好，既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA，由于DNA片段较大易于损伤断裂，因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA。

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