微生物的平板划线实验中中划线部分的菌落数量很少，仅仅在第三次划线的尾部可以观察到菌落，原因是 应该是操作的原因。平板划线法是在平板上实现混合菌种或单菌种分离，并选取单细菌菌落纯培养的常用方法。在平板划线实来验中，要严格按照操作规程和方法进行，否则很难得到理想的结果。其过程是：1、选用平整、圆滑的接种环，按自无菌操作法挑取少量菌种。或用移液管吸取少量菌液。2、拿接种环先在培养基一侧划3—4条连续的平行线百(线条多少应依挑菌量的多少面定)。划完后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。或用移液管向培养基近边缘处的表面滴入一滴（不高于0.1 ml）菌度液，再用接种环按上面的方法以菌液为起始点划线。3、平板转动一个方向，用接种环从上次划线的末端开始，向问另一方向划3－4条平等线。4、依此类推答，再在培养基其他未划过线的地方划线。如此操作，应当能在培养基上获得单细胞菌落，且越是后来划的线，菌落越是稀疏。
细菌的分离与培养
平板划线法的目的 用接种环在2113平板培养基表面通过分区划线而达到纯化5261分离微生物的一种方法。是将4102微生物样品在固体培养基表面多1653次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。扩展资料：平板划线法的基本步骤：1、融化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。2、倒平板：待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15ml)，平置，待凝固。3、作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右（平板转动一定角度约60℃），以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。4、划线操作。挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。5、恒温培养：将划线平板倒置，于37℃（或28℃）培养，24hr后观察。参考资料来源：。
细菌划线分离法有哪几种划线方式，划线时应注意什么 用的是四2113区划线法或五区划线法划线的形式有5261多种，可将一4102个平板分成四个不同面积的1653小区进行划线，第一区(A区)面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区，第四区(D区)，则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用.为了得到较多的典型单菌落，平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A.顺便说一下，划线划得好看不好看并不重要，只要分离效果好就行，每个人都可以有自己理想的划线方法，但最关键的依然是效果.此外大致判断接种环上的菌量也是日常积累的经验之一，判断得好就能将细菌分离得更好.注意事项1、平板不能倒得太薄，最好在使用前一天倒好。为防止平板表面产生冷凝水，倒平板前培养基温度不能太高。2、用于平板划线的培养基，琼脂含量宜高些（2%左右），否则会因平板太软而被划破。3、用于划线的接种环，环柄宜长些（约10cm），环口应十分圆滑，划线时环口与平板间的夹角宜小些，动作要轻巧，以防划破平板。4、为了取得良好的划线效果，可事先用圆纸垫在空培养皿内画上4区，并用接种环练习划线动作，待通过模拟试验熟练操作和掌握划线要领后，再正式进行平板划线。
稀释涂布平板法和平板划线法 平板划线法是用于分离菌落的，稀释涂布平板法是用于计数的.补充：平板划线法分离的同时就是为了纯化.
平板划线法和稀释涂布平板法各有什么优缺点？ 一、平板划线分离法由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落.二、稀释倒平板法先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如 1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000…），然后分别取不同稀释液少许，与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出出菌落.如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的.随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养.稀释涂布法：优点：可以计数，可以观察菌落特征.缺点：吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延.一般用于平板培养基的回收率计数。稀释混合平板法：优点：可以计数，吸收量为1ml，较方便.优点：不能观察菌落特征.一般用于菌落总数的计数。平板划线法：优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离。缺点：不能计数一般用于从菌种的分纯。涂布法使用较多，但有时不均匀 稀释倒。
平板划线接种的原理 平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表点击此处添加图片说明面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经。
