有谁知道colony formation assay 1、平板克隆形成试验基本步骤：(1)取对数生长期的单层培养细胞，用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，把细胞悬浮在10%胎牛血清的RPMI。
克隆形成实验，结果怎样计数 做克隆形成实验首抄先需要在平皿或孔bai板中接种相du同数量的处理过的细胞zhi，所以需dao要计数细胞后再种于平皿或孔板中。如果在放疗之前就接种细胞，则经过放疗后，就 不能保证成活的细胞数量是相同的，因而在计算克隆形成率时分母则不一致。而计数活细胞的目的是为了将经过放疗后已经死亡的细胞过滤掉，只计数活细胞，将活 细胞种于平皿或孔板中。经过大概两周的时间，观察细胞的克隆形成情况，克隆形成超过50个的计为一个克隆，计数不同处理的细胞可克隆形成个数，从而得到不 同放疗剂量对细胞的影响程度。
细胞克隆形成实验试验步骤
为什么制备单克隆抗体的过程中B淋巴细胞要从脾脏中获取 脾脏是B淋巴细胞主要产生的地方 这是由于单克隆抗体制备中所使用的鼠源型B淋巴细胞，是用先相应的抗原接种于小鼠。
平板接种的方法，平板接种即用接种环将菌种接至平板培养基上，或用移液管、滴管将一定体积的菌液移至平板培养基上，然后培养。平板接种的目的是观察菌落形态，分离纯化菌种，。
用凝胶电泳成像仪怎么对平板菌落进行单克隆计数分析 、平板划线离 由接种环菌操作沾取少许待离材料菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其形式连续划线微物细胞数量随着划线数增加减少并逐步散划线适宜微物能散经培养平板表面单菌落 二、稀释倒平板 先待离材料用菌水作系列稀释（1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000…）别取同稀释液少许与已溶化并冷却至 45 ℃左右琼脂培养基混合摇匀倾入灭菌培养皿待琼脂凝固制能含菌琼脂平板保温培养定间即菌落稀释平板表面或琼脂培养基现散单菌落菌落能由细菌细胞繁殖形随挑取该单菌落或重复操作数便纯培养 稀释涂布：优点：计数观察菌落特征 缺点：吸收量较少较麻烦平板干燥效容易蔓延 般用于平板培养基收率计数 稀释混合平板：优点：计数吸收量1ml较便 优点：能观察菌落特征 般用于菌落总数计数 平板划线：优点：观察菌落特征混合菌进行离缺点：能计数
平板划线法的步骤是什么？ 1. 1.融化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。2.倒平板：待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15ml)，平置，待凝固。。
单克隆抗体制备的基本原理与过程？有什么意义 原理：B淋巴细胞在抗2113原的刺激下，能够分化5261、增殖形4102成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的1653能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。过程1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活）。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h换液一次，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。3）细胞融合的关键：1技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。2融合试验。
