紫外分光光度法测酸性红b 酸性橙Ⅱ的检测方法

常用来测定蛋白质含量的方法有哪些？优缺点是什么？ 1、凯氏定氮法凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。优点：可用于所有食品的蛋白质分析中；操作相对比较简单；实验费用较低；结果准确，是一种测定蛋白质的经典方法；用改进方法（微量凯氏定氮法）可测定样品中微量的蛋白质。缺点：凯氏定氮法只是一个氧化还原反应，把低价氮氧化并转为氨盐来测定，而不能把高价氮还原为氮盐的形式，所以不可以测出物质中所有价态的氮含量。2、双缩脲法双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10mg。优点：测定速度较快，干扰物质少，不同蛋白质产生的颜色深浅相近。。分光光度法怎么测定地表水的pH值 分光光度法与溶液H(+)是如何建立关系的？我不认为H(+)会直接产生紫外或可见光谱；所以，只能是利用H(+)或OH(-)参加反应，先生成有色物质，再间接测定pH值；如你可以将酸碱指示剂加入后，利用指示剂的吸收再与溶液的pH值建立关系.酸性橙Ⅱ的检测方法 据中国国内文献报道，酸性橙II的测定方法有纸层析法和分光光度法等，这些方法操作时间长，定量精度差。经过大量实验摸索，建立了高效液相色谱（HPLC）法测定食品中酸性橙Ⅱ的方法，本方法快速、准确，适用于食品中合成食用色素与非食用色素酸性橙II的同时测定。原理：食品中非食用色素酸性橙Ⅱ经提取制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性，采用外标法进行定量。仪器：高效液相色谱仪：Waters515泵，Waters紫外可见波长检测器，KQ-100DB型数控超声波清洗器，离心机。试剂：重蒸馏水、乙酸、甲醇（色谱纯）、聚酰胺粉（过200目筛）、乙酸铵溶液（0.02mol/L）、柠檬酸溶液、无水乙醇-氨水-水溶液。酸性橙Ⅱ：美国Aldrich公司；柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄：国家标准物质中心。酸性橙Ⅱ标准溶液：准确称取干燥的酸性橙标样0.1000g，蒸馏水溶解，定容至100ml，此溶液1ml含1.00mg酸性橙Ⅱ。临用时，用蒸馏水稀释至1ml含10mg的酸性橙Ⅱ标准使用液。混合着色剂标准溶液：准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、酸性橙Ⅱ各0.100g，置100ml容量瓶中，加pH6水到刻度，配成水溶液（1.00mg/ml），临用时，用水稀释经0.45。出现了什么问题？ 紫外可见分光光度计也可以用于可见分光光度，可以测定亚硝酸盐含量，1cm的比色皿可以用于测定，只是检出限比2cm的比色皿高，如果亚硝酸盐含量高，对结果没有影响三氧化二铁含量的测定方法较多，如重铬酸钾滴定法、高锰酸钾滴定法、EDTA络合滴定法、紫外-可见分光光度法(磺基水杨酸或邻菲罗啉分光光度法)、原子吸收分光光度法等。3.4.4.1 重铬酸钾容量法试样用酸分解或碱熔融分解，试液用氯化亚锡将铁还原成Fe2+离子，加氯化汞氧化过量的氯化亚锡，在硫酸、磷酸混合酸存在情况下，以二苯胺磺酸钠作指示剂，重铬酸钾标准溶液滴定至紫色。反应方程式为现代岩矿分析实验教程该法适用于总铁量大于5%的样品总铁含量的测定。用SnCl2-HgCl2-K2Cr2O7法测铁，方法成熟，准确度高。但由于使用了HgCl2，将有害元素Hg引入了环境，造成环境污染，这是该法测铁的最大缺点。3.4.4.2 高锰酸钾滴定法高锰酸钾滴定法原理基本与重铬酸钾滴定法相同。前处理均采用氯化亚锡将铁还原成Fe2+离子，滴定剂则采用酸性高锰酸钾溶液。在酸性溶液内，高锰酸钾与亚铁离子作用，高锰酸根离子被还原，铁离子被氧化，终点时稍过量的高锰酸钾使溶液呈现微红色。其反应方程式为现代岩矿分析实验教程3.4.4.3 EDTA络合滴定法基于Fe3+在酸性溶液中与EDTA能形成稳定的配合物，在pH=1.8～2.0的酸性溶液中，以磺基水杨酸(SS)为指示剂，在60～70℃下，用EDTA直接滴定。邻菲啰啉分光光度法测定铁含量的原理是是什么？用该法测得的铁含量是否为试样中的亚铁含量？为什么？ 邻菲啰啉分光光度法测定铁含量的原理：在pH=2~9的溶液中，邻二氮菲与2价亚铁离子（Fe2+）发生显色反应，该反应的选择性很高，而且生成的橙红色络合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其溶液在510nm（可见光）有最大吸收峰，利用此显色反应，可以用可见光分光光度法测定微量铁。物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有特征结构的结构集团，存在选择吸收特性的最大实收波长，形成最大吸收峰，而产生特有的吸收光谱。该法测得的铁含量为试样中的亚铁的含量。因为只有2价铁与邻菲啰啉形成橘红色的络合物。而3价铁不发生这个显色反应，但能生成浅蓝的络合物。扩展资料：邻菲啰啉的性质：1、邻菲啰啉指示剂可通过将1.485g一水合邻二氮菲和0.695gFeSO4·7H2O溶于100mL水中来配制。用于硫酸高铈滴定铁盐的指示剂。一个相关的配体是红菲绕啉（BPT），4，7-二苯基-1，10-邻二氮菲。2、邻菲啰啉也可用于烷基锂化合物含量的分析。使样品与少量（约1mg）的邻二氮菲作用，呈深色，再用醇类滴定，直到达到。

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