紫外分光光度法测dna

如何用紫外吸收法测定DNA含量？ 如何用紫外分光光度计测DNA浓度 究竟紫外分光光度法测DNA浓度怎么算。。 这个，我测DNA浓度的时候只关注两个数值。一，A260/A280，如果在1.8+—0.2范围内，这就说明提取的DNA还比较纯净。最好是1.8二，浓度，37ug/ml就是37ng/ul，如果你是用1ml菌液小提的话，这个是低了很多。一般小提在100-200ng/ul吧怎样用紫外分光光度计测DNA质量和浓度？ 一般用微量分光光度计比较快速简便，DNA浓度会直接在软件上显示，A260/A280的比值用于评估样品的纯度，纯净的样品比值大于1.8，低于2.0。较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。电泳法和紫外分光光度法检测DNA的浓度和纯度,哪种方法更好 两种方法各有优劣.电泳法更直观,如果你有DNA Maker,并且知道Maker的浓度,就可以使用一维条带分析软件如Quantity One分析样品中DNA的含量,而且可以很直观地了解目的DNA的纯度、大小等特性.但是,由于电泳中染色特异性很强,对DNA、RNA之外的小分子污染情况无法检测.紫外法可对样品中所有具紫外吸收特性的物质给出一个综合的结果.因此如果样品中有其他影响DNA后续操作的物质,样品吸光值就会有很大偏移.值得注意的是,紫外法仅可作为一个参考,吸光值是结果,而不是原因.吸光值符合要求并不能代表DNA纯度符合要求.一般紫外分析后还是要跑个电泳,两者结合就可靠多了.除了用紫外分光光度法测定DNA的解链温度外，还有没有其他的方法？ 在你的DNA中加入SYBE GREEN染料，在荧光PCR仪器上做熔解曲线，出峰的地方就是DNA的解链温度了。SYBE GREEN染料会跟双链DNA结合，发出荧光信号被仪器检测到；DNA解链之后，释放出SYBE GREEN染料，荧光信号消失，仪器就检测到荧光值的降低了紫外分光光度计法测DNA纯度纯度偏小的原因? 1.DNA发生了损失,比如降解（虽然很少）2.溶解DNA的溶液影响,水溶液的吸光低于tris中的吸光如何用紫外分光光度计测DNA浓度？ 实验原理DNA/RNA在260nm处有最大的吸收峰，蛋白质在280nm处有最大的吸收峰，盐和小分子则集中在230nm处。因此，可以用260nm波长进行分光测定DNA浓度，OD值为1相当于大约50μg/ml双链DNA。如用25px光径，用H2O稀释DNA/RNA样品n倍并以H2O为空白对照，根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度：DNA（ug/ml）=50×OD260读数×稀释倍数。RNA（ug/ml）=40×OD260读数×稀释倍数。DNA/RNA纯品的OD260/OD280为1.8或2.0，故根据OD260/OD280的值可以估计DNA的纯度。若比值较高说明含有RNA，比值较低说明有残余蛋白质存在。OD230/OD260的比值应在0.4-0.5之间，若比值较高说明有残余的盐存在.本实验室机器显示是OD260\\OD230，则比值应在2-2.5之间，偏小则说明有残余盐剩余。实验步骤1.将制备的DNA悬浮溶解于TE缓冲液中[pH8.O,1Ommo1/L的Tris缓冲液,内含〈1mmol/LEDTA〉]或悬浮溶解在灭菌水中(依据DNA含量加水)。2.用可扫描的紫外分光光度计测定制备的DNA/RNA的紫外吸收曲线，测定OD260和OD280，并计算比值：OD260/OD280，纯DNA的此比值约为1.8～2.0。纯RNA的此比值约为大于2.0。3.根据：每毫升1微克的纯DNA的OD260值=0.020，计算所得DNA的纯度；每毫升1微克的纯RNA的OD260值=0用紫外分光光度法测定核酸有什么缺点 核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统（－C＝C一C＝C 一）,能够强烈吸收250~280nm 波长的紫外光.核酸（DNA,RNA）的最大紫外吸收值在260nm 处.遵照Lambert-Beer 定律,可以从紫外光吸收值的变化来测定核酸物质的含量.在不同pH 溶液中嘌呤、嘧啶碱基互变异构的情况不同,紫外吸收光也随之表现出明显的差异,它们的摩尔消光系数也随之不同.所以,在测定核酸物质时均应在固定的pH溶液中进行.核酸的摩尔消光系数（或吸收系数）,通常以ε（ρ）来表示,即每升含有一摩尔核酸磷的溶液在260nm 波长处的消光值（即光密度,或称为光吸收）.核酸的摩尔消光系数不是一个常数,而是依赖于材料的前处理、溶液的pH 和离子强度发生变化.它们的经典数值（pH=7.0）如下：DNA 的ε（ρ）=6 000 8 000RNA 的ε（ρ）=7 000 10 000小牛胸腺DNA 钠盐溶液（pH=7.0）的ε（ρ）=6 600,DNA 的含磷量为9.2%,含1μg/mL DNA 钠盐的溶液光密度为0.020.RNA 溶液（pH=7.0）的ε（ρ）=7 700~7 800,RNA 的含磷量为9.5%,含1μg/mL RNA 溶液的光密度为0.022~0.024.采用紫外分光光度法测定核酸含量时,通常规定：在260nm 波长下,浓度为1μg/mL 的 DNA 溶液其光密度为0.020,如何用紫外分光光度计测DNA浓度 如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先，分光光度计测量的样品必须是均一的，摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。

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